| hBAFF-R-Fc融合分子的构建、表达与鉴定 |
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| 引用本文： | 丁涵露,吴雄飞,何娅妮,倪兵. hBAFF-R-Fc融合分子的构建、表达与鉴定[J]. 免疫学杂志, 2008, 24(5) |
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| 作者姓名： | 丁涵露 吴雄飞 何娅妮 倪兵 |
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| 作者单位： | [1]第三军医大学西南医院肾内科,重庆400038 [2]第三军医大学大坪医院肾内科,重庆400042 [3]第三军医大学免疫学研究所,重庆400038 |
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| 摘 要： | 目的 构建人hBAFF-R-Fc基因的真核表达质粒,并表达有生物学活性的人hBAFF-R-Fc融合蛋白.方法 化学合成法合成人hBAFF-R膜外区cDNA编码基因,酶切测序证实后,与hIgG4.Fc/Leu235Glu突变体一起导入线性化pSec/WG真核表达载体,阳性重组体酶切测序证实后,采用脂质体法稳定转染CHO细胞,用夹心ELISA检测其表达;收集的蛋白经蛋白A亲和纯化,以SDS-PAGE与Western blot进行鉴定并检测hBAFF-R-Fc的活性.结果 测序证实构建的hBAFF-R膜外区与hBAFF-R-Fc cDNA阅读框完整,EIJSA证实转染hBAFF-R-Fc基因的CHO细胞培养上清中含有hBAFF-R-Fc蛋白,SDS-PAGE与 Westernblot鉴定证实其为hBAFF-R-Fc蛋白.hBAFF-R-Fc蛋白对活化后的B细胞有抑制增殖的作用.结论 成功构建了人hBAFF-R-Fc真核表达载体,并使有生物学活性的hBAFF-R-Fc蛋白在CHO细胞上获得了稳定表达.为进一步研究该蛋白在狼疮性肾炎等自身免疫性疾病治疗中的作用奠定了基础.
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| 关 键 词： | 真核表达 |
Construction, eukaryotic expression, and characterization of hunmn hBAFF-R-Fc eukaryotic expression plasmid |
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| DING Han-lu,WU Xiong-fei,HE Ya-ni,NI Bing. Construction, eukaryotic expression, and characterization of hunmn hBAFF-R-Fc eukaryotic expression plasmid[J]. Immunological Journal, 2008, 24(5) |
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| Authors: | DING Han-lu WU Xiong-fei HE Ya-ni NI Bing |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | BAFF-R hBAFF-F-R-Fc |
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