| 实时荧光定量聚合酶链反应检测人锌指蛋白23方法的构建 |
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| 引用本文： | 牟琴峰,施媛萍,郑璐,魏江,罗光华.实时荧光定量聚合酶链反应检测人锌指蛋白23方法的构建[J].实用医技杂志,2013,20(1):12-14. |
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| 作者姓名： | 牟琴峰 施媛萍 郑璐 魏江 罗光华 |
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| 作者单位： | 苏州大学附属第三医院 |
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| 摘 要： | 目的建立检测人锌指蛋白23(human zinc finger 23,ZNF23)的实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术。方法采用Primer Express Versions 3.0设计引物及TaqMan探针,检测ZNF23基因。将扩增的ZNF23基因片段纯化后与pMD19-T载体连接,克隆构建含ZNF23基因片段的重组质粒,作为定量检测ZNF23基因表达的标准品。结果 PCR扩增产物经测序分析证实为ZNF23特异性片段。本法灵敏度为650 copies/μL,线性范围为(6.50×102)-(6.50×107)copies/μL,相关系数R2为0.999,扩增效率E为97.28%,批间变异系数为0.78%～7.53%。结论成功建立了检测人ZNF23的实时荧光定量PCR方法,且该方法特异性好、灵敏度高、通量高。
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| 关 键 词： | 基因表达调控 肿瘤 聚合酶链反应 反转录因子 |
Establishing a method for quantitation of human zinc finger 23 load using real-time fluorescence quantitative pol-ymerase chain reaction |
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| MOU Qin-feng,SHI Yuan-ping,ZHENG Lu,WEI Jiang,LUO Guang-hua.Establishing a method for quantitation of human zinc finger 23 load using real-time fluorescence quantitative pol-ymerase chain reaction[J].Journal of Practical Medical Techniques,2013,20(1):12-14. |
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| Authors: | MOU Qin-feng SHI Yuan-ping ZHENG Lu WEI Jiang LUO Guang-hua |
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| Institution: | .Third Affiliated Hospital of Suzhou University,Changzhou 213003,China |
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