TGF-β诱导人肝癌细胞系凋亡信号转导机理的研究

目的探讨转化生长因子β1（TGF-β1）诱导人肝癌细胞系凋亡及其与β53基因及Smad4的关系。方法选用3种含有不同β53基因状态的人肝癌细胞系，均分为TGF-β1诱导组（实验组）和对照组；应用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记技术（TUNEL）对TGF-β1诱导的肝癌细胞的凋亡进行定量检测；另外，应用Lipofectamine 2000把含有Smad4结合元件和荧光素酶基因的TGF—β1可诱导的荧光素酶报告质粒对细胞进行转染，再经TGF-β1作用，分别检测其相对荧光素酶活性。结果在应用TUNEL检测的3个细胞系中，TGF—β1能诱导HepG2细胞（野生型β53）凋亡，其细胞凋亡率实验组明显高于对照组（P〈0．05）；而Huh-7（突变型β53）和Hep3B细胞（缺失型β53）凋亡细胞较少，其细胞凋亡率实验组与对照组差异无统计学意义（P〉0．05）。荧光素酶检测提示，HepG2细胞的Smad4表达活性实验组明显高于对照组（P〈0．05）；而Huh-7和HepB细胞的Smad4表达较低，实验组与对照组差异无统计学意义（P〉0．05）。结论Hep2细胞系比Huh-7和HepB细胞系更易发生TGF-β1诱导的凋亡．Smad4是TGF-β1信号转导途径的主要调控因子之一。