肺泡Ⅱ型上皮细胞的分离培养和磷脂酶A_2的损伤作用

本文报道了豚鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的分离和原代培养方法,并在体外研究了磷脂酶A_2(PLA_2)对培养细胞的损伤作用。将胰酶消化液注入支气管肺泡腔,肺组织消化后剪碎、振摇、过滤,可得到172.3×10~6细胞/豚鼠,Ⅱ型细胞占33.6％。细胞经短期贴壁培养选择,再连续培养48h,可得到7.9×10~6细胞/豚鼠,Ⅱ型细胞占66.1％,活力96.2％。贴壁细胞经EDTA处理,Ⅱ型细胞纯度提高到76.2％(63.9％～92％)。培养细胞经相差显微镜、光镜和电镜观察证实为Ⅱ型细胞,在培养液中加PLA_2 300U/ml作用4h,细胞脱落率明显增高,乳酸脱氢酶释放增加,说明PLA_2对细胞有损伤和促使脱落的作用,可能在肺损伤发生中有重要意义。