重组酶介导的等温核酸扩增技术检测淡水鱼华支睾吸虫囊蚴的初步应用 |
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作者姓名: | 陈剑峰 王志奇 黄文明 王进 陈莉娟 孙运乐 赵兰梅 赵扬 钱印 段峻伟 张强 |
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作者单位: | 1. 江苏省泰州市疾病预防控制中心;2. 江苏省泰州市泰兴市疾病预防控制中心;3. 江苏省泰州市海陵区疾病预防控制中心;4. 江苏省泰州市姜堰区疾病预防控制中心;5. 江苏省泰州市兴化市疾病预防控制中心;6. 国家卫生健康委员会寄生虫病预防与控制技术重点实验室,江苏省寄生虫与媒介控制技术重点实验室,江苏省血吸虫病防治研究所 |
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摘 要: | 目的 评价重组酶介导的核酸等温扩增技术(recombinase-aided amplification,RAA)用于淡水鱼肉样本中华支睾吸虫囊蚴检测效果,为后续该方法标准化及现场应用提供科学依据。方法 2022年6—9月在江苏省泰州市姜堰区、兴化市、泰兴市华支睾吸虫感染阳性人群所在行政村河道内采集野生淡水鱼样本。取6份不含华支睾吸虫囊蚴的鱼肉组织(每份5 g),分别加入0、1、2、4、8、16个华支睾吸虫嚢蚴,提取鱼肉组织基因组DNA后采用荧光RAA法进行检测,评价该方法检测灵敏度;分别以华支睾吸虫、东方次睾吸虫、钩棘单睾吸虫、台湾棘带吸虫嚢蚴基因组DNA为模板,采用荧光RAA法检测,评价其交叉反应;分别采用荧光RAA法和压片法检测现场采集的淡水鱼样本,比较两种方法检测华支睾吸虫效果。结果 含1、2、4、8、16个华支睾吸虫囊蚴的鱼肉组织样本均出现阳性扩增,荧光RAA法可在20 min内对5 g鱼肉组织中含1个华支睾吸虫囊蚴的样本实现阳性扩增;以东方次睾吸虫、钩棘单睾吸虫、台湾棘带吸虫嚢蚴基因组DNA为模板进行RAA检测,结果均为阴性。对采集的1 735条淡水鱼分别采用荧光RAA法和压...
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关 键 词: | 华支睾吸虫 囊蚴 重组酶介导的等温核酸扩增 淡水鱼 检测效果 |
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