重组人骨形成蛋白4基因腺相关病毒载体体外诱导成骨作用的初步研究

目的观察重组人骨形成蛋白4（human bone morphogenetic protein4,hBMP4）基因腺相关病毒载体诱导兔骨髓间充质干细胞（BMSCs）成骨方向分化的作用。方法全骨髓法培养兔BMSCs,应用重组人骨形成蛋白4基因腺相关病毒MOI值为5×10^4vg/cell转染兔BMSCs,观察细胞形态,行ALP染色、Von Kossa染色、茜素红染色及ALP含量测定,观察成骨活性。结果AAV-hBMP4转染BMSCs后,细胞形态呈现典型的成骨改变,ALP染色及Von Kossa、染色茜素红染色均出现成骨的特征性改变。细胞上清ALP含量测定,实验组ALP含量明显增高（p〈0.01）。结论实验获得的病毒载体滴度高、感染性好,完全可以满足骨组织工程的需要。AAV-hBMP4转染效率高,AAV-hBMP4转染BMSCs后,BMSCs表现明显的成骨活性改变。