利用寡核苷酸微阵列芯片分析ERRα过度表达对子宫内膜癌HEC-1A细胞转录因子活性的影响 |
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引用本文: | 孙蓬明,毛晓丹,林芬,赵丽君,王建六,魏丽惠,宋一一.利用寡核苷酸微阵列芯片分析ERRα过度表达对子宫内膜癌HEC-1A细胞转录因子活性的影响[J].中国妇幼保健,2012,27(26):4112-4115. |
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作者姓名: | 孙蓬明 毛晓丹 林芬 赵丽君 王建六 魏丽惠 宋一一 |
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作者单位: | 1. 福建省妇幼保健院福建医科大学省妇幼教学医院妇科肿瘤研究室 福建福州 350001 2. 北京大学人民医院妇科 |
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基金项目: | 国家自然科学基金资助项目〔30600666〕;福建省科技计划项目〔2008I0011,2009Y007〕;国家人事部2007年度留学回国人员择优资助课题〔国人厅发(2007)170号〕 |
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摘 要: | 目的:讨论过度表达雌激素受体相关受体(ERRα)对子宫内膜癌细胞HEC-1A中不同转录因子转录活性的影响。方法:构建带有绿色荧光蛋白和G418耐药基因筛选标记的真核表达质粒pEGFP-N1-3FLAG-ERRα,将质粒转染子宫内膜癌细胞株HEC-1A,荧光显微镜下检测并通过G418高浓度筛选、低浓度维持建立ERRα稳定高表达的子宫内膜癌细胞株HEC-1A/ERRα。分别抽提子宫内膜癌细胞HEC-1A、转染质粒空载体的HEC-1A/空载体细胞,ERRα过度表达的HEC-1A/ERRα细胞的核蛋白。将核蛋白与CY3、CY5双色标记的326检测信号通道的转录因子芯片(寡核苷酸微阵列芯片)杂交并通过双色共聚焦激光扫描仪分析。结果:转染ERRα真核表达质粒后,与HEC-1A细胞和转染载体的HEC-1A/空载体细胞对比,子宫内膜癌细胞HEC-1A/ERRα中ERRα的mRNA和蛋白表达明显增加。HEC-1A-ERRα细胞株与HEC-1A/空载体细胞株转录因子活性比较显示7个转录位点的活性发生显著改变,其中调控SREBP,AP-1,c-Myc,Usf-1/2转录因子的结合位点活性下调,而调控RFX-1,PPAR-α,PPAR-γ的转录因子的结合位点活性上调。而在HEC-1A/空载体细胞株和HEC-1A细胞株中未检出上述7种转录因子的差异表达。结论:①寡核苷酸微阵列芯片是一种有效的筛选转录因子的工具;②ERRα过度表达下调子宫内膜癌细胞HEC-1A中转录因子SREBP,AP-1,c-Myc,Usf-1/2的转录活性,上调RFX,PPARα,PPARγ的转录活性。
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关 键 词: | 子宫内膜癌 转录因子活性 转录因子芯片 雌激素受体相关受体 |
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