SYBR Green实时PCR检测恶性疟原虫和间日疟原虫的临床检验技术研究

目的建立鉴别恶性疟和间日疟的SYBR Green实时PCR检测方法。方法针对恶性疟原虫和间日疟原虫18S rRNA基因设计引物,优化引物浓度与退火温度,建立可扩增出两种疟原虫基因片段的SYBR Green实时PCR,并进行54例临床标本检测,其中恶性疟32例、间日疟22例。以镜检法为金标准分析敏感度和特异度等指标。结果该方法可扩增出恶性疟原虫和间日疟原虫18S rRNA基因片段,并能检出混合感染,特异性好。该方法检测恶性疟原虫或间日疟原虫的敏感度为97.30%(36/37),特异度为5.88%(1/17);检测恶性疟原虫,敏感度为87.50%(21/24),特异度为63.33%(19/30);检测间日疟原虫,敏感度为69.23%(9/13),特异度为68.29%(28/41)。结论所建立的SYBR Green实时PCR方法能较准确地诊断疟疾并鉴别虫种,敏感度高,在混合感染的诊断方面具有优越性。

Research on SYBR Green based real time PCR for detection of Plasmodium falciparum and Plasmodi-um vivax