| 东海贻贝抗菌肽Myticin A基因的克隆表达及其生物学活性 |
| |
| 引用本文： | 仲燕,刘军华,张建鹏,冯伟华,焦炳华.东海贻贝抗菌肽Myticin A基因的克隆表达及其生物学活性[J].第二军医大学学报,2005,26(1):0065-0068. |
| |
| 作者姓名： | 仲燕 刘军华 张建鹏 冯伟华 焦炳华 |
| |
| 作者单位： | 第二军医大学基础医学部生物化学和分子生物学教研室,上海,200433;第二军医大学基础医学部生物化学和分子生物学教研室,上海,200433;第二军医大学基础医学部生物化学和分子生物学教研室,上海,200433;第二军医大学基础医学部生物化学和分子生物学教研室,上海,200433;第二军医大学基础医学部生物化学和分子生物学教研室,上海,200433 |
| |
| 摘 要： | 目的:在毕赤酵母表达系统中表达贻贝抗菌肽Myticin A并检测其生物学活性.方法:提取贻贝总mRNA,逆转录合成cDNA,PCR扩增得到DNA片段.PCR产物与pMD18-T连接,得到阳性重组载体pMD18-Myticin A.Myticin A基因插入载体pPIC9K中,得到的重组载体pPIC9K-Myticin A转化至宿主菌中.得到高抗性阳性菌株并进行诱导表达.发酵上清进行Tricine-SDS-PAGE分析并用CM-sepharose柱和Sephadex G-25柱纯化,Western印迹法鉴定并检测生物学活性.结果:获得重组载体pPIC9K-Myticin A.高抗性多拷贝阳性表达菌株GS115/pPIC9K-Myticin A经甲醇诱导后,Tricine-SDS-PAGE证实其相对分子质量为4 500,表达量为14%以上,纯化后纯度达到90%以上.Western印迹法证实所表达样品为Myticin A.表达样品对巨大芽胞杆菌的生长有抑制作用,对小鼠成纤维细胞(L929)、胰腺癌细胞(SW1990)、结肠腺癌细胞(LoVo)的生长均有明显抑制作用.结论:应用毕赤酵母表达系统能较好地表达抗菌肽Myticin A,生物学活性研究证实其具有抗革兰阳性菌作用,明显抑制肿瘤细胞生长.
|
| 关 键 词： | 抗菌肽 Myticin A 贻贝 重组质粒 毕赤酵母 基因表达 |
| 文章编号： | 0258-879X(2005)01-0065-04 |
| 收稿时间： | 5/6/2004 12:00:00 AM |
| 修稿时间： | 7/9/2004 12:00:00 AM |
Cloning,expression and biological characterization of Myticin A,an antimicrobial peptide from mussel(Mytilus) |
| |
| ZHONG Yan,LIU Jun-hua,ZHANG Jian-peng,FENG Wei-hua ,JIAO Bing-hua.Cloning,expression and biological characterization of Myticin A,an antimicrobial peptide from mussel(Mytilus)[J].Academic Journal of Second Military Medical University,2005,26(1):0065-0068. |
| |
| Authors: | ZHONG Yan LIU Jun-hua ZHANG Jian-peng FENG Wei-hua JIAO Bing-hua |
| |
| Institution: | ZHONG Yan,LIU Jun-hua,ZHANG Jian-peng,FENG Wei-hua *,JIAO Bing-hua * |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | Myticin A |
| 本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录！ |
| 点击此处可从《第二军医大学学报》浏览原始摘要信息 |
| 点击此处可从《第二军医大学学报》下载免费的PDF全文 |
|
