| 海马神经干细胞不同传代方法的比较 |
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| 引用本文： | 李梅,王湘臻,徐铁军. 海马神经干细胞不同传代方法的比较[J]. 中国组织工程研究与临床康复, 2011, 15(6): 985-989. DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2011.06.009 |
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| 作者姓名： | 李梅 王湘臻 徐铁军 |
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| 作者单位： | 徐州医学院解剖学和神经生物学教研室,江苏省徐州市,221002 |
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| 基金项目： | 江苏省自然科学基金，江苏省高校研究生科研创新计划项目 |
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| 摘 要： | 背景:体外培养神经干细胞,在悬浮培养时由于自身增殖特性会形成球,传代时将会面临如何将细胞球分离成单细胞的问题。目的:寻求理想的大鼠海马神经干细胞传代方法,以获得大量可增生的神经干细胞以供研究。方法:分离新生1dSD大鼠海马神经干细胞,原代培养至五六天时,分别用机械吹打法、胰蛋白酶、TrypLE和Accutase消化法分离神经干细胞球。之后每7d传代1次,连续传代3次。分别于每次传代后第1天和传代后第4天计数活细胞比例和细胞球数目,实验重复3次。结果与结论:神经干细胞球经3种酶消化后获得的均是单细胞;经机械吹打后既有单个细胞,也有小细胞球分布于培养液中。在酶消化法中,Accutase消化法传代后神经干细胞的活细胞比例明显高于胰蛋白酶消化(P<0.01)和TrypLE消化法(P<0.05)。同时,Accutase消化法传代后新形成的细胞球数目也较其余各组多(P<0.01)。提示在实验条件下,Accutase消化法能够较好地将神经干细胞球分离成存活率较高、能快速形成新的克隆球的单个细胞,是较为理想的神经干细胞分离传代方法。
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| 关 键 词： | 神经干细胞 海马 细胞培养 传代 免疫细胞化学 大鼠 |
Comparison of different passage methods for hippocampal neural stem cells |
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| Li Mei,Wang Xiang-zhen,Xu Tie-jun. Comparison of different passage methods for hippocampal neural stem cells[J]. Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research, 2011, 15(6): 985-989. DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2011.06.009 |
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| Authors: | Li Mei Wang Xiang-zhen Xu Tie-jun |
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| Affiliation: | Li Mei,Wang Xiang-zhen,Xu Tie-jun Department of Anatomy and Neurobiology,Xuzhou Medical College,Xuzhou 221002,Jiangsu Province,China |
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| Abstract: | BACKGROUND:Neural stem cells(NSCs) cultured in vitro can form sphere due to its proliferation characteristics during suspension culture.How to isolate cell spheres into single cells is a problem facing us during subculture.OBJECTIVE:To establish an ideal subculture method for harvesting NSCs from the rat hippocampus to obtain a large number of NSCs for investigation.METHODS:NSCs were isolated from neonatal 1-day rat hippocampus.After a growth of typically 5-6 days,primary neurospheres were passaged by mecha... |
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