| pEGFP-N1-PP1α真核表达载体的构建及其在骨肉瘤细胞中的表达 |
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| 引用本文： | 崔笑,尹宗生.pEGFP-N1-PP1α真核表达载体的构建及其在骨肉瘤细胞中的表达[J].安徽医科大学学报,2010,45(1):17-20. |
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| 作者姓名： | 崔笑 尹宗生 |
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| 作者单位： | 安徽医科大学第一附属医院骨科,合肥,230022;安徽医科大学第一附属医院骨科,合肥,230022 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 |
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| 摘 要： | 目的 构建人PP1α基因真核表达载体, 并观察其在人骨肉瘤细胞株(U-2OS)中的表达,为进一步研究PP1对骨肉瘤细胞凋亡影响提供基础.方法 提取U-2OS细胞中总RNA,RT-PCR扩增PP1α并克隆至pEGFP-N1载体,鉴定出阳性克隆送测序, 以重组质粒转染U-2OS细胞,通过Western blot检测转染细胞中PP1α的表达.结果 成功扩增PP1α基因大小片段,重组质粒pEGFP-N1-PP1α的酶切鉴定及测序结果均证明PP1α基因成功克隆到真核表达载体中,Western blot结果证实转染重组质粒后的U-2OS细胞PP1α蛋白表达水平增强.结论 实验将pEGFP-N1-PP1α质粒转染到U-2OS细胞,可以在U-2OS细胞中获得PP1α蛋白增强表达.
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| 关 键 词： | 骨肉瘤 基因表达 蛋白磷酸酶Ⅰ 遗传载体 |
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