| 一管酒精法提取转基因小鼠胚胎组织基因组的实验方法及应用 |
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| 引用本文： | 翁敏杰,杜建霖,蒲荻,张进,李晓群,刘亚杰,佘强.一管酒精法提取转基因小鼠胚胎组织基因组的实验方法及应用[J].重庆医科大学学报,2012,37(4):328-331. |
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| 作者姓名： | 翁敏杰 杜建霖 蒲荻 张进 李晓群 刘亚杰 佘强 |
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| 作者单位： | 重庆医科大学附属第二医院心血管内科,重庆,400010 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目，重庆市卫生局重点资助项目，重庆医科大学校级重点资助项目 |
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| 摘 要： | 目的:优化提取基因组的方法,建立高效、简便、快速提取基因组DNA的方法,用于大批量转基因小鼠鉴定。方法:用一管酒精基因组DNA抽提法抽提基因组DNA。结果:经过分光光度法检测基因组DNA浓度、纯度及电泳分析DNA质量,显示一管酒精抽提法提取的基因组与经典酚/氯仿提取法提取的基因组产量、纯度及质量没有明显差别;酶切全基因组后,2种方法获得的基因组都可以被酶完全切开;两者模板都能成功应用PCR扩增来鉴定基因敲入小鼠并可应用于基因组测序及Real-time PCR检测基因敲入小鼠中外源基因并鉴定其相对拷贝数。结论:一管酒精基因组抽提法得到的DNA质量可靠,可高效、简便、快速鉴定转基因小鼠及进行基因组DNA酶切、测序、Real-time PCR等后续实验。
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| 关 键 词： | T盒转录因子18 基因敲入 基因组DNA |
Protocol and application of ethanol method to extract genomic DNA from transgenic mouse embryos |
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| WENG Minjie
,
DU Jianlin
,
PU Di
,
ZHANG Jin
,
LI Xiaoqun
,
LIU Yajie
,
SHE Qiang.Protocol and application of ethanol method to extract genomic DNA from transgenic mouse embryos[J].Journal of Chongqing Medical University,2012,37(4):328-331. |
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| Authors: | WENG Minjie DU Jianlin PU Di ZHANG Jin LI Xiaoqun LIU Yajie SHE Qiang |
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| Institution: | (Department of Cardiology,the Second Affiliated Hospital,Chongqing Medical University) |
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| Abstract: | |
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