TLR4 及MD2 反义基因对内毒素诱导的肺泡Ⅱ型细胞活化的影响

目的 观察Toll样受体4(Toll-like receptor 4, TLR4)及myeloid differentiation protein 2(MD2)反义基因对内毒素(lipopolysaccharide,LPS)诱导的肺泡Ⅱ型细胞NF-κB活化的影响. 方法 培养的肺泡Ⅱ型细胞分为:正常细胞(对照)组、LPS组、LPS+转染空载体组、LPS+转染TLR4反义基因组、LPS+转染MD2反义基因组、LPS+转染TLR4-MD2反义基因组(n=8).Northern blot检测转染细胞的TLR4 及MD2 mRNA表达,Western blot检测转染细胞TLR4及MD2蛋白表达,电泳迁移率改变法检测 NF-κΒ的活性,ELISA测定细胞培养上清中TNF-α和IL-6含量. 结果 与对照组比较,LPS刺激后的细胞TLR4及MD2 mRNA和蛋白表达、NF-κB活性、TNF-α和IL-6的生成均显著增加(P<0.01);而转染反义基因组细胞与其他LPS刺激组比较,TLR4 及MD2 mRNA和蛋白的表达、NF-κB活性及TNF-α和IL-6的含量均明显降低(P＜0.01). 结论 TLR4及MD2反义基因能有效抑制LPS诱导的肺泡Ⅱ型细胞的活化.