| 抗氯霉素抗体可变区基因的克隆与序列分析 |
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| 引用本文： | 李黄金,赵林,陈伟,刘家劲,李秋,郭志云,林冬霞,田素娟,黄树林. 抗氯霉素抗体可变区基因的克隆与序列分析[J]. 现代预防医学, 2009, 36(24): 4655-4658 |
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| 作者姓名： | 李黄金 赵林 陈伟 刘家劲 李秋 郭志云 林冬霞 田素娟 黄树林 |
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| 作者单位： | 广东药学院生命科学与生物制药学院生物技术系,广州,510006 |
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| 基金项目： | 广东省科技攻关计划资助项目，广东药学院科研启动基金 |
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| 摘 要： | [目的]克隆并分析抗氯霉素单克隆抗体(抗CAPmAb)的轻、重链可变区基因VL和VH. [方法]从分泌抗CAP mAb的杂交瘤细胞株4D10中提取总RNA,利用RT-PCR技术和一系列简并引物扩增VL和VH基因,扩增产物克隆于pMD18-T后测序,利用VBASE2数据库进行比对分析. [结果]有多对引物扩增到VL或VH基因,但同一基因的不同引物扩增到的序列相同.VL和VH基因长度分别为342 bp和357 bp,分别编码114个和119个氨基酸残基.编码产物均具有4个FR区、3个CDR区和2个特征性半胱氨酸残基,符合典型的KABAT结构特点,分别属于IGKV1亚群和IGH-V3609VH8家族.所克隆序列已被GenBank收录,序列号分别为FJ477893和FJ477894. [结论]成功克隆到抗CAPmAb的VL和VH基因,为进一步构建氯霉素残留检测用基因工程抗体打下了基础.
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| 关 键 词： | 抗氯霉素单克隆抗体 轻链可变区基因 重链可变区基因 克隆 序列分析 |
CLONING AND SEQUENCE ANALYSIS OF VARIABLE GENES OF MONOCLONAL ANTIBODY AGAINST CHLORAMPHENICOL |
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