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| 小鼠Prohibitin真核表达质粒的构建及在293T细胞中的表达 | |
| 作者单位： | ;1.中国医科大学实验动物部;2.解放军第二0二医院;3.辽宁省疾病预防控制中心毒理检测所;4.中国医科大学附属第一医院肿瘤研究所生物治疗研究室 |
| 摘 要： | 目的构建小鼠Prohibitin基因真核表达质粒,在293T细胞中进行表达鉴定,为研究小鼠Prohibitin基因功能奠定基础。方法以小鼠Prohibitin基因cDNA序列为模板,设计特定引物,应用PCR的方法扩增其编码序列全长,并将其克隆到真核表达载体pEFP-C2中,将获得的重组表达质粒转染293T细胞,应用RTPCR、Western blot方法检测其表达。结果成功构建了pEGFP-Prohibitin真核表达质粒,将其成功转染293T细胞,pEGFP-Prohibitin转染组Prohibitin蛋白和mRNA在293T细胞的表达量比转染空载转染组明显增加。结论成功构建了真核表达质粒pEGFP-Prohibitin,并在真核细胞表达良好,为研究小鼠Prohibitin的基因功能奠定了基础。 |
| 关 键 词： | Prohibitin 重组质粒 转染 小鼠 293T细胞 |
Establishment and expression of recombinant Prohibitin plasmid in 293T cells |
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| Keywords: | |
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