| 弓形虫GRA1基因的体外扩增、克隆及鉴定 |
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| 引用本文： | 贾雪梅,陈观今,郭虹,郑焕钦.弓形虫GRA1基因的体外扩增、克隆及鉴定[J].中国人兽共患病杂志,2002,18(3):17-19,9. |
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| 作者姓名： | 贾雪梅 陈观今 郭虹 郑焕钦 |
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| 作者单位： | 昆明医学院寄生虫学教研室，中山医科大学寄生虫研究所，中山医科大学寄生虫研究所，中山医科大学寄生虫研究所 昆明650031 |
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| 基金项目： | 美国中华医学基金会 (项目号 93 -5 94)，“2 11”重点学科建设课题项目基金资助 |
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| 摘 要： | 目的 体外扩增弓形虫RH株致密颗粒蛋白GRA1基因 ,并构建真核表达质粒。方法 从接种了弓形虫RH株的小鼠腹水中收集、纯化速殖子 ,提取基因组DNA ;据已知的GRA1基因列 ,设计合成一对引物 ,并引入EcoRⅠ和BamHⅠ酶切位点。应用PCR技术 ,从弓形虫RH株基因组DNA中扩增GRA1基因片段。扩增目的基因片段经纯化、双酶切后 ,插入真核表达质粒pEGFP -N3中 ,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞 ,于卡那霉素阳性LB平板上筛选阳性克隆。重组子经EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切、PCR鉴定。结果 从弓形虫RH株基因组DNA中扩增出 785bp的GRA1基因片段 ,构建重组质粒pEGFPN3-GRA1,酶切和PCR鉴定产物大小均与预期值相符。 结论 成功地从弓形虫RH株基因组DNA中获取了GRA1基因 ,并构建了pEGFPN3-GRA1重组质粒。为重组质粒的进一步表达和核酸疫苗的研究创造了条件
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| 关 键 词： | 弓形虫 致密颗粒抗原1 聚合酶链反应 基因克隆 |
| 文章编号： | 1002-2694(2002)03-0017-04 |
Amplification,cloning and identification of the CRA1 gene from Toxoplasma gondii in vitro |
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| JIA Xuemei,CHEN Guanjin,GUO Hong,ZHENG Huanqin.Amplification,cloning and identification of the CRA1 gene from Toxoplasma gondii in vitro[J].Chinese Journal of Zoonoses,2002,18(3):17-19,9. |
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| Authors: | JIA Xuemei CHEN Guanjin GUO Hong ZHENG Huanqin |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Toxoplasma gondii GRA1 gene PCR Cloning |
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