| SYBR Green Ⅰ联合TaqMan荧光定量PCR检测HBV-DNA的意义 |
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| 引用本文： | 赵友云,高应林,王春香,乐惠荣. SYBR Green Ⅰ联合TaqMan荧光定量PCR检测HBV-DNA的意义[J]. 热带医学杂志, 2007, 7(6): 575-577 |
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| 作者姓名： | 赵友云 高应林 王春香 乐惠荣 |
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| 作者单位： | 湖北省中医院检验科,武汉,430061;武汉大学生命科学学院,武汉,430072;湖北省中医院检验科,武汉,430061 |
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| 摘 要： | 目的探索SYBR GreenI联合TaqMan荧光定量PCR检测HBV-DNA的意义。方法选择浓度为108.48、105.70和103.70copies/ml的3种HBV-DNA阳性血清和<1×103.0copies/ml的阴性血清各1份,在TaqMan-PCR混合反应体系中加入SYBR Green I组成双荧光PCR(TaqMan SYBR Green I组),同时进行TaqMan和SYBR Green I的单荧光PCR(分别为TaqMan组和SYBR Green I组),设置同一PCR和熔解曲线的循环参数,检测HBV-DNA含量及其Tm,每种方法一次检测每份血清5次。结果TaqMan SYBR Green I组检测的HBV-DNA阳性血清均为阳性,其平均含量为108.55±、105.79±、103.81±,与TaqMan组的108.49±、105.69±、103.72±copies/ml0.320.290.300.310.300.25对应浓度值取10对数比较,无统计学意义(t=0.31、0.54和0.27,P>0.05);与SYBR Green I组的108.41±、0.35105.21±和103.26±copies/ml(不含未检出的两次血清)比较,除高浓度外,中低浓度有统计学意义(t=2.90和0.340.262.62,P<0.05)。TaqMan SYBR Green I组和SYBR Green I组阳性血清均出现明显熔解曲线,熔解温度(Tm)分别为71.8℃、72℃和79.8℃,阴性血清未出现扩增曲线和Tm值。结论SYBR Green I联合TaqMan-PCR检测HBV-DNA时,具有能维持TaqMan-PCR的高灵敏度、特异性更强,并能同时检测HBV-DNATm的特点,为HBV的DNA多态性分析,尤其是在HBV基因分型方面提供了新的检测思路。
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| 关 键 词： | SYBR Green Ⅰ TaqMan探针 定量PCR HBV-DNA含量 Tm |
| 文章编号： | 1672-3619（2007）06-0575-03 |
| 修稿时间： | 2007-01-222007-03-31 |
Combination of SYBR Green I and TaqMan Probe in the Detection of HBV-DNA by Fluorescent Quantitative PCR |
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| ZHAO You-yun,GAO Ying-lin,WANG Chun-xiang,LE Hui-rong. Combination of SYBR Green I and TaqMan Probe in the Detection of HBV-DNA by Fluorescent Quantitative PCR[J]. Journal Of Tropical Medicine, 2007, 7(6): 575-577 |
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| Authors: | ZHAO You-yun GAO Ying-lin WANG Chun-xiang LE Hui-rong |
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| Affiliation: | 1. Department of Clinical Laboratories, Hubei Provincial Hospital of Traditional Chinese Medicine, Wuhan 430061; 2. College of Life Science, Wuhan University, Wuhan 430072, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Tm |
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