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RNA干扰基因敲除MAGE-1在恶性胶质瘤U87细胞中的初步研究
引用本文:程光,章翔,鲍炜,张赟,张新海,曹卫东,高大宽,宋蕾.RNA干扰基因敲除MAGE-1在恶性胶质瘤U87细胞中的初步研究[J].医学研究生学报,2006,19(4):292-298.
作者姓名:程光  章翔  鲍炜  张赟  张新海  曹卫东  高大宽  宋蕾
作者单位:1. 第四军医大学西京医院,解放军神经外科研究所,陕西,西安,710032
2. 第四军医大学西京医院,免疫教研室,陕西,西安,710032
摘    要:目的:通过构建抑制MAGE-1的短片段双链核糖核酸(siRNA)表达载体,鉴定其在人恶性胶质瘤细胞系U87细胞中对MAGE.1基因表达的干涉作用。方法:化学合成2对编码短发夹RNA序列的靶向MAGE—1基因寡核苷酸链,克隆至经BglⅡ、HindⅢ双酶切的pSUPER载体上,重组构建核糖核酸干扰(RNAi)质粒载体。利用RT-PCR、流式细胞术和荧光显微镜,检测经稳定转染后胶质瘤U87细胞中MAGE-1的表达,以了解siRNA的干涉效果。结果:重组构建的pSUPER—MAGE—1载体经双酶切、电泳及插入基因片段序列分析,表明寡核苷酸链成功地插入至预计位点,且序列与预期完全一致。稳定转染后G418筛选出的U87多克隆细胞MAGE-1的表达经RT—PCR、流式细胞术和荧光显微镜检测,2对siRNA均有较明显的干扰作用。结论:载体的成功构建并能对U87细胞中的MAGE—1分子进行RNAi,为进一步研究MAGE—1在肿瘤中的作用,分析基因功能,展开肿瘤基因治疗奠定了基础。

关 键 词:短片段双链核糖核酸  核糖核酸干扰  胶质瘤
文章编号:1008-8199(2006)04-0292-06
修稿时间:2005年11月7日

Knockdown MAGE-1 by RNA interference system in U87 of the human glioma cell line
CHENG Guang,ZHANG Xiang,BAO Wei,ZHANG Yun,ZHANG Xin-hai,CAO Wei-dong,GAO Da-kuan,SONG Lei.Knockdown MAGE-1 by RNA interference system in U87 of the human glioma cell line[J].Bulletin of Medical Postgraduate,2006,19(4):292-298.
Authors:CHENG Guang  ZHANG Xiang  BAO Wei  ZHANG Yun  ZHANG Xin-hai  CAO Wei-dong  GAO Da-kuan  SONG Lei
Abstract:
Keywords:pSUPER  MAGE-1
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