用免疫亲和层析法制备高纯度纤维连结蛋白

纤维连结蛋白(Fibronectin,FN)是一种分子量为44万的糖蛋白。本文报道应用溴化氰活化琼脂糖珠4B与明胶偶联亲和层析柱来制备FN的方法。以健康男性血浆为原料,加入层析柱中,使FN吸附在明胶上,用0.1mol/L三羟甲基氨基甲烷(Tris)—盐酸(HCI)缓冲液(pH7.5,含0.02mol/L柠檬酸钠)冲洗,除去不结合物质。然后用含1mol/L NaCl的上述缓冲液洗杂蛋白,再用含3mol/L脲的上述缓冲液洗脱,得到高纯度的FN。此方法简单,所得FN纯度高,效果好。