| 牲畜链霉菌（Streptomyces cattleya）thienamycin合成阻断变株的筛选、阻断部位的确定及变株原生质体的研究 |
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| 引用本文： | 李戎锋,王以光.牲畜链霉菌（Streptomyces cattleya）thienamycin合成阻断变株的筛选、阻断部位的确定及变株原生质体的研究[J].中国抗生素杂志,1996(2). |
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| 作者姓名： | 李戎锋 王以光 |
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| 作者单位： | 中国医学科学院协和医科大学医药生物技术研究所 |
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| 摘 要： | 以ｔｈｉｅｎａｍｙｃｉｎ（ＴＮＭ）产生菌Ｓ．ｃａｔｔｌｅｙａ为出发菌株，利用终浓度为１．５ｍｇ／ｍｌ强诱变剂亚硝基胍在ｐＨ９．０、３７℃条件下对其孢子悬液处理３０ｍｉｎ，得到稳定的ＴＮＭ生物合成阻断变株Ｙ＿３。纸层析后进行茚三酮显迹和生物显迹表明Ｙ＿３变株积累一种无活性中间产物，其迁移率不同于ＴＮＭ。建立了Ｙ＿３变株中间产物的分离纯化方法。酸水解和氨基酸组分分析表明Ｙ＿３中间产物为谷氨酸和丙氨酸组成的二肽，可能是形成碳青霉烯双环母核的底物，提示丙氨酸可能也是ＴＮＭ的前体，Ｙ＿３变株阻断在形成碳青霉烯双环母核的环化步骤。Ｙ＿３变株具有较高的原生质体形成率和再生率。原生质体在４０℃进行处理可以在不影响再生率的前题下提高ＤＮＡ转化率。通过以上研究建立了以Ｙ＿３变株为宿主的ＴＮＭ环化酶基因克隆受体系统。
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| 关 键 词： | 牲畜链霉菌，阻断变株，原生质体，thienamycin |
Screening,block position determination and study on protoplast of thienamycin block mutant from Streptomyces cattleya |
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| Li Rongfeng and Wang Yiguang.Screening,block position determination and study on protoplast of thienamycin block mutant from Streptomyces cattleya[J].Chinese Journal of Antibiotics,1996(2). |
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| Authors: | Li Rongfeng and Wang Yiguang |
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| Keywords: | S cattleya Block mutant Protoplast Thienamycin |
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