基于HMGB1/NF-κB通路探讨温经通络汤对IL-1β诱导小鼠原代软骨细胞炎症的影响

目的 观察温经通络汤对IL-1β诱导关节软骨细胞炎症的影响并探讨其作用机制。方法 从小鼠膝关节软骨中提取原代软骨细胞，并用甲苯胺蓝染色法鉴定；IL-1β诱导软骨细胞炎症模型，采用慢病毒RNAi-HMGB1转染软骨细胞，干扰HMGB1的表达；后用不同浓度的温经通络汤含药血清干预细胞；Western blot分析各组细胞中HMGB1、NF-κB信号通路蛋白的表达水平；qPCR检测HMGB1、NF-κB1、NF-κB2 mRNA的表达水平；ELISA检测细胞上清中炎症因子IL-6、PGE-2和TNF-α的表达水平。结果 与正常培养的细胞相比，IL-1β诱导软骨细胞炎症模型中HMGB1的表达水平显著上升(P<0.01),且p-IκBα/IκBα和p-P65/P65蛋白的相对表达量与NF-κB1、NF-κB2 mRNA的表达水平均有所提高(P<0.01);与模型组比较，RNAi-HMGB1慢病毒转染可显著下调HMGB1的表达水平(P<0.01),并抑制p-IκBα/IκBα和p-P65/P65蛋白的相对表达量(P<0.01)与NF-κB1、NF-κB2 mRNA的表达水平...