联合靶向Survivin和Livin的双重siRNA表达载体的构建及其活性鉴定 |
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引用本文: | 陈孟璋,郭芬.联合靶向Survivin和Livin的双重siRNA表达载体的构建及其活性鉴定[J].广东药学院学报,2013,29(3):314-317. |
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作者姓名: | 陈孟璋 郭芬 |
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作者单位: | 陈孟璋 (广州白云山拜迪生物医药有限公司,广东广州,511495); 郭芬(广东药学院生命科学与生物制药学院,广东广州,510006); |
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基金项目: | 广东省优秀博士论文作者资助项目(项目编号:sybzzxm201051)广东药学院科研启动基金(项目编号:2007SMK02) |
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摘 要: | 目的构建联合靶向凋亡抑制基因Survivin和Livin的双重siRNA表达载体并鉴定其活性,为研究同时下调Survivin和Livin表达的协同效应奠定基础。方法选取已证实有效的分别靶向Survivin和Livin的siRNA序列,通过定向克隆技术构建同时编码2个siRNA分子的真核表达载体pSilencer2.1-Sur-Liv,将其转染HepG2细胞后检测Survivin和Livin mRNA水平的变化,同时转染表达DsRed2-SURVIVIN和GFP-LIVIN的Hela荧光报告细胞观察荧光强度变化。结果双重siRNA表达载体pSilencer2.1-Sur-Liv构建成功,转染HepG2后Survivin和Livin mRNA水平明显下降,转染Hela报告细胞后荧光强度变弱。结论联合靶向Survivin和Livin的双重siRNA表达载体构建成功,并能有效下调Survivin和Livin的表达水平。
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关 键 词: | RNA干扰 Survivin Livin 双重siRNA 基因治疗 |
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