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双特异性磷酸酶-1过表达对肾癌细胞株A498增殖和侵袭的影响
引用本文:巩会杰,牛少曦,李世超,沈东来,顾良友,李新涛,高宇,张瑜,马鑫,姚远新,张旭. 双特异性磷酸酶-1过表达对肾癌细胞株A498增殖和侵袭的影响[J]. 军医进修学院学报, 2015, 0(4)
作者姓名:巩会杰  牛少曦  李世超  沈东来  顾良友  李新涛  高宇  张瑜  马鑫  姚远新  张旭
作者单位:解放军总医院 泌尿外科,北京,100853
摘    要:目的:构建携带人双特异性磷酸酶-1(dual specificity phosphatase-1,DUSP-1)基因的过表达慢病毒载体并包装病毒,感染人肾癌细胞株A498后观察DUSP-1的过表达对肾癌细胞株A498增殖和侵袭能力的影响。方法从pCMV6-XL5-DUSP-1质粒上获得目的基因片段,采用DNA重组技术将DUSP-1基因插入到慢病毒表达载体质粒Plv-EGFP(2A)Puro中,获得重组plv-EGFP(2A)Puro-DUSP-1载体。重组慢病毒表达质粒及辅助包装质粒pH1、pH2共转染293T细胞进行慢病毒包装,收集病毒上清并感染肾癌细胞株A498,利用Western blot检测细胞DUSP-1蛋白的表达情况。用MTS法检测细胞增殖能力的变化,Transwell法检测细胞侵袭能力的变化。结果成功构建携带DUSP-1过表达载体。包装病毒后成功感染A498细胞株,DUSP-1蛋白表达较对照A498细胞株显著上调。重组质粒组细胞在490 nm吸光值明显上升(P<0.05);细胞侵袭试验中,重组质粒组的穿膜细胞数明显高于空载体组(P<0.05)。结论成功构建了人DUSP-1基因的重组慢病毒表达载体pLV-EGFP(2A)Puro-DUSP-1,进行病毒包装后成功培养稳定高表达DUSP-1基因的肾癌细胞株;DUSP-1基因的过表达具有促进肾癌细胞株A498增殖和侵袭的作用。

关 键 词:双特异性磷酸酶-1  肾癌细胞株A498  基因表达调控,肿瘤

Effect of DUSP-1 overexpression on proliferation and invasion of renal cell carcinoma cell line A 498
GONG Huijie,NIU Shaoxi,LI Shichao,SHEN Donglai,GU Liangyou,LI Xintao,GAO Yu,ZHANG Yu,MA Xin,YAO Yuanxin,ZHANG Xu. Effect of DUSP-1 overexpression on proliferation and invasion of renal cell carcinoma cell line A 498[J]. Academic Journal of Pla Postgraduate Medical School, 2015, 0(4)
Authors:GONG Huijie  NIU Shaoxi  LI Shichao  SHEN Donglai  GU Liangyou  LI Xintao  GAO Yu  ZHANG Yu  MA Xin  YAO Yuanxin  ZHANG Xu
Abstract:
Keywords:dual specificity phosphatase 1  renal carcinoma cell line A498  gene expression regulation,neoplastic
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