大鼠胚胎神经干细胞两种不同分离、传代方法的比较 |
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引用本文: | 胡钧涛,涂汉军,张力,李东升,李新建,黄宽明,付锐.大鼠胚胎神经干细胞两种不同分离、传代方法的比较[J].中国神经精神疾病杂志,2006,32(2):164-166. |
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作者姓名: | 胡钧涛 涂汉军 张力 李东升 李新建 黄宽明 付锐 |
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作者单位: | 郧阳医学院附属太和医院神经外科,湖北,十堰,442000 |
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基金项目: | 湖北省卫生厅青年科技人才基金 |
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摘 要: | 目的体外培养大鼠胚胎神经干细胞(NSCs),比较不同分离、传代方法对其生长的影响。方法取怀孕15d的大鼠,分别用机械分离法和含0.01%EDTA的胰蛋白酶消化法分离海马区细胞,均以1×106/mL的活细胞密度接种到无血清的NSCs培养基中培养,分离纯化至P5代。以含10%胎牛血清(FBS)和2%多聚赖氨酸的DMEM/F12诱导分化,免疫细胞化学鉴定。结果机械分离组获得的活细胞及培养后的神经干细胞球数目明显多于胰蛋白酶消化组,其细胞贴壁率却高于胰蛋白酶消化组。取神经干细胞球及诱导分化后的细胞作免疫细胞化学染色鉴定,细胞分别呈Nestin、β-tubulin-Ⅲ、GFAP和O4阳性反应。结论大鼠胚胎海马区有NSCs存在,离体培养时能分裂增殖,并能被诱导分化。机械分离法和胰蛋白酶消化法各有利弊,可以根据实验情况交叉采用两种不同的分离方法,以稳定高效地培养出NSCs。
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关 键 词: | 大鼠 胚胎 神经干细胞 细胞培养 |
修稿时间: | 2005年9月8日 |
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