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MiR-34a在牙周膜细胞成骨向分化中的作用
引用本文:程孟文,周毅. MiR-34a在牙周膜细胞成骨向分化中的作用[J]. 口腔医学研究, 2017, 33(9): 928. DOI: 10.13701/j.cnki.kqyxyj.2017.09.005
作者姓名:程孟文  周毅
作者单位:1. 武汉大学口腔医学院口腔基础医学省部共建国家重点实验室培训基地和口腔生物医学教育部重点实验室 湖北 武汉 430079;2. 武汉大学口腔医院修复科 湖北 武汉 430079
基金项目:国家自然科学基金(编号:81200812)武汉市应用基础研究计划项目(编号:2016060101010043)
摘    要:目的:探讨微小RNA-34a在牙周膜细胞成骨向分化中的作用。方法:体外分离培养人牙周膜细胞(hPDLCs),取第3~6代用于实验。首先,对hPDLCs进行成骨诱导液处理,在3、7、14 d后利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-34a基因的表达变化。然后,构建慢病毒载体pCDH-pre-miR-34a和pCDH,将慢病毒载体感染hPDLCs,构建pre-miR-34a过表达细胞模型(hPDLCs/34a)和空载体对照细胞模型(hPDLCs/pCDH),并诱导hPDLCs成骨分化3、7、14和21 d。分析成骨标志基因碱性磷酸酶(ALP)、Runt相关转录因子2(Runx2)、骨钙素(OCN)及骨涎蛋白(BSP)表达变化,ALP活性及钙化结节形成的茜素红染色情况。结果:hPDLCs经成骨分化诱导后, miR-34a基因表达在第3天开始明显升高,并呈逐渐增高趋势,差异均有统计学意义(P<0.001)。与hPDLCs/pCDH组相比,hPDLCs/34a组的ALP活性和茜素红染色均有明显减弱。qRT-PCR结果显示:hPDLCs/34a组的ALP表达量在成骨诱导7 d时较hPDLCs/pCDH组降低(P<0.05);Runx2、OCN及BSP表达量的差异在各时间点基本无统计学意义。结论:在体外条件下,miR-34a抑制人牙周膜细胞成骨向分化。

关 键 词:人牙周膜细胞  成骨分化  微小RNA-34a  实时荧光定量PCR  
收稿时间:2017-01-20

Role of Micro-34a in Induced-mineralization of Human Periodontal Ligament Cells
CHENG Meng-wen,ZHOU Yi. Role of Micro-34a in Induced-mineralization of Human Periodontal Ligament Cells[J]. Journal of Oral Science Research, 2017, 33(9): 928. DOI: 10.13701/j.cnki.kqyxyj.2017.09.005
Authors:CHENG Meng-wen  ZHOU Yi
Affiliation:1. The State Key Laboratory Breeding Base of Basic Science of Stomatology (Hubei-MOST) & Key Laboratory of Oral Biomedicine Ministry of Education, School & Hospital of Stomatology, Wuhan University, Wuhan 430079, China;2. Department of Prosthodontics, Hospital of Stomatology, Wuhan University, Wuhan 430079, China.
Abstract:
Keywords:Human periodontal ligament cells    Osteogenic differentiation   MicroRNA-34a   Quantitative real-time PCR  
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