化橘红对糖尿病心肌病心肌细胞TGF-β1/Smad信号通路的干预作用

目的观察化橘红对糖尿病心肌病（DCM）大鼠心肌细胞TGF-β1/Smad信号通路的干预作用。方法（1）构建DCM大鼠模型，将40只大鼠用链脉佐菌素处理后，15只血糖浓度<16.7 mmol/L的大鼠纳入空白对照组，剩余的25只血糖浓度>16.7 mmol/L的大鼠随机分为DCM组（n=11）与化橘红组（n=14）。化橘红组大鼠给予化橘红400 mg/(kg·d)灌胃，DCM组和对照组给予等量生理盐水灌胃。测量各组大鼠不同时间点血糖（1、8、16、22周）；测量心功能相关指标；光镜下观察心肌形态学改变，电镜下心肌纤维化定量分析；测定心肌胶原总量；免疫组化测定心肌胶原；Western印迹检测心肌细胞TGF-β1、Smad、MMP-9、MMP-2、TIMP-1等蛋白含量；RT-PCR检测TGF-β1、MMP-9、MMP-2、TIMP-1等蛋白的mRNA表达。（2）构建心肌成纤维细胞增殖模型，随机分为两组，化橘红预处理组为血清培养基加0.5 mmol/L化橘红，而对照组为等量血清培养基。检测两组一氧化氮变化、TGF-β1蛋白、c-fos蛋白、p27蛋白，iNOS蛋白、Cyclin D蛋白表达情况。结果化橘红组的大鼠各时间点血糖、心肌纤维化、心肌胶原总量及各型胶原较DCM组显著下降，心收缩、舒张功能明显改善（P<0.05），TGF-β1、Smad、MMP-9、MMP-2、TIMP-1蛋白的表达明显下调（P<0.05），相关蛋白的mRNA表达也明显抑制（P<0.05）。化橘红预处理组一氧化氮、TGF-β1蛋白、c-fos蛋白、p27蛋白，iNOS蛋白、Cyclin D蛋白表达情况较对照组相比明显下降（P<0.05）。结论化橘红对DCM中TGF-β1/Smad通路起到了抑制作用，从而调控其下游的MMPs/TIMPs等通路，改善DCM的心肌纤维化进程，抑制心肌肥厚，减少心肌的损伤。