大鼠椎间盘纤维环细胞的培养和鉴定

背景：许多学者认为椎间盘退变必有其细胞学改变，而探讨椎间盘退变机制必须有可靠的细胞模型。目的：尝试建立大鼠椎间盘纤维环细胞体外培养体系，并对其表型进行鉴定。设计、时间及地点：以细胞为观察对象的随机分组实验，于2005-09/2006-05 在解放军第三军医大学新桥医院实验中心完成。材料：清洁级1月龄SD大鼠30只，体质量100 g左右，雌雄不拘。方法：采用酶消化法分离大鼠椎间盘纤维环细胞，进行单层培养。 主要观察指标：观察其形态结构和生物学特性，通过甲苯胺蓝、免疫细胞化学和碱性磷酸酶染色等方法对其细胞表型进行鉴定。结果：成功进行细胞单层培养，细胞形态为圆形或多角形，胞质含有大量的粗面内质网；原代细胞生长较慢，第2代细胞生长加快；细胞具有甲苯胺蓝异染性；有Ⅰ型胶原和Ⅱ型胶原的阳性表达；细胞碱性磷酸酶染色阳性。结论：采用酶消化法可成功培养大鼠椎间盘纤维环细胞，表型鉴定符合纤维环细胞特征。

Cultivation and identification of annulus fibrosus cells of intervertebral disc in rats