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人胸苷激酶基因在大肠杆菌中的表达
引用本文:丁克祥,郑永晨,吴朝阳,王攀,张杰,胡燕祝,吕沅津.人胸苷激酶基因在大肠杆菌中的表达[J].中国老年学杂志,2004,24(11):1029-1031.
作者姓名:丁克祥  郑永晨  吴朝阳  王攀  张杰  胡燕祝  吕沅津
作者单位:1. 第一军医大学老年生物医学研究中心,广东,广州,510515
2. 吉林大学第二医院中心实验室
3. 湖南大学化工学院
4. 武汉理工大学复杂系统研究中心
5. 武汉大学人民医院
6. 北京盛泽伟业科技发展公司
基金项目:国家 8 63计划项目 (2 0 0 2AA2 1 70 51 ),国家科技部 2 0 0 2年度国际科技合作重点项目计划〔国科发外字 (2 0 0 3) 2 6号,项目序号 :No.67〕
摘    要:目的 在大肠杆菌中表达人胸苷激酶 (hTK)。方法 用内切酶将hTKTA克隆中的hTK基因切下 ,并与同样内切酶切的载体PET2 8a 连接 ,转化大肠杆菌 ,筛选阳性克隆 ,酶切和DNA序列分析鉴定 ,用IPTG诱导培养阳性克隆 ;SDS -PAGE鉴定hTK在大肠杆菌中的表达。结论 hTK基因重组入PET2 8a 的EcoRI和XhoI位点 ,IPTG可以明显诱导hTK在大肠杆菌中表达。

关 键 词:人胸苷激酶  大肠杆菌  DNA重组
文章编号:1005-9202(2004)11-1029-03
修稿时间:2004年10月30

Expressing human thymidine kinase in E.coli
DING Ke-xiang,ZHENG Yong-chen,WU Zhao-yang,et al..Expressing human thymidine kinase in E.coli[J].Chinese Journal of Gerontology,2004,24(11):1029-1031.
Authors:DING Ke-xiang  ZHENG Yong-chen  WU Zhao-yang  
Institution:DING Ke-xiang,ZHENG Yong-chen,WU Zhao-yang,et al .
Abstract:Objective Expressing human thymidine kin ase in E. coli . Methods The hTK fragments were obtained from hTK TA clon e with restriction enzymes; and the fragments were recombined with PET28a cut by same enzymes .The recombinant plasmids transformed E.coli(BL-21),and the pos itive clones were identified by restriction enzymes and DNA sequence.SDS-PAGE s howed hTK expression in E.coli. Conclusions The hTK ge ne was recombined into the sites between EcoRI and XhoI of PET28a , and IPTG c an induce the hTK expression of recombinant PET28a in E.coli.
Keywords:hTK  Escherichia coli  DNA recombinati on
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