人肾小管上皮细胞血清饥饿法同步化方法的研究

目的：探讨采用血清饥饿法建立将人肾小管上皮细胞（HKC）的同步化方法。方法：将HKC分为6个不同低血清浓度组及对照组，分别采用胎牛血清浓度为0、1、2、3、4、5和100mL／L的DMEM培养液培养24h。根据流式细胞术结果选择的最佳同步化HKC的胎牛血清浓度。将HKC的同步化处理时间分别延长为24h、48h和72h，选择最佳同步化时间。用MTT法绘制生长曲线观察血清饥饿处理对HKC生长的影响。采用免疫细胞化学方法验证血清饥饿同步化处理HKC的效果。结果：选择无血清（0mL／L）和1mL／L为HKC最佳同步化的胎牛血清浓度，选择48h为HKC同步化最佳时间。细胞生长曲线表明采用1mL／L胎牛血清的DMEM培养液培养48h后恢复正常培养的HKC细胞，其生长曲线更接近于正常培养的细胞。Brdu进一步证明，用1mL／L胎牛血清的DMEM培养液培养48h可以使90％以上的HKC细胞处于G0／G1期。结论：用1mL／L胎牛血清的DMEM培养液培养48h可获得90％以上的G0／G1期HKC。