| 兔羊膜成体干细胞培养及体外定向诱导神经细胞分化 |
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| 引用本文： | 徐蔚,王震,曲申,刘思维,王培军.兔羊膜成体干细胞培养及体外定向诱导神经细胞分化[J].中华眼底病杂志,2013,29(3). |
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| 作者姓名： | 徐蔚 王震 曲申 刘思维 王培军 |
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| 作者单位： | 同济大学附属同济医院眼科,上海,200065 |
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| 基金项目： | 上海市科委自然科学基金，上海市卫生局面上科研项目 |
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| 摘 要： | 目的 观察体外分离、培养的兔羊膜成体干细胞(ADSC)定向诱导神经细胞的分化结果.方法 新西兰雌兔羊膜分离、培养ADSC.实时定量聚合酶链反应(PCR)检测羊膜ADSC的纤连蛋白(Fibronectin)、巢蛋白(Nestin)、波形蛋白(Vimentin) mRNA的表达水平.单克隆形成实验证实羊膜ADSC是否具有自我复制能力.培养成功的ADSC中加入神经分化诱导培养基诱导神经细胞分化.诱导分化5d后,免疫荧光染色检测β-微管蛋白(tubulin)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达.结果 培养的ADSC在24 h后逐渐从羊膜组织中移行出；72 h可见明显的多角形细胞富集在羊膜组织周边；120 h后多角形细胞致密地分布于羊膜四周.分裂后的子代细胞形态同父代细胞.单克隆形成实验结果证实羊膜ADSC具有自我复制能力.实时定量PCR检测结果显示,羊膜ADSC的Nestin、Vimentin、Fibronectin mRNA分别是脾脏细胞同种分子表达量的15.79、1.91、7.65倍,两者差异有统计学意义(Z=-5.243、-3.972、-2.524,P＜0.05).免疫荧光染色结果显示,β-tubulin在大部分细胞的胞质中表达；GFAP在部分细胞的细胞质中表达.结论 羊膜ADSC具有自我复制能力,在合适条件下能够分化成神经元和神经胶质细胞.
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| 关 键 词： | 成体干细胞/细胞学 细胞分化/免疫学 细胞培养技术/方法 羊膜 |
Differentiation of rabbit amnion-derived stem cells induced into neural cells |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Adult stem cells/cytology Cell differentiation/immunology Cell culture techniques/methods Amnion |
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