| 一对高亲和力抗人肌钙蛋白Ⅰ单克隆抗体的制备及鉴定 |
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| 作者姓名： | 郝庆钦 周建平 韩旭 刘培 许秀丽 温新宇 王玲 田亚平 |
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| 作者单位： | 解放军总医院生化科,北京100853;南开大学医学院,天津300071;军事医学科学院毒物药物研究所,北京,100850;北京德奥平生物技术有限责任公司;解放军总医院生化科,北京,100853 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划)资助项目(项目编号：2011AA02A111) |
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| 摘 要： | 目的 获取抗人肌钙蛋白Ⅰ（cTnI）的单克隆抗体（McAb）.方法 以人cTnI作为抗原,免疫Balb/c小鼠,通过杂交瘤技术制备了抗人cTnI高亲和力、高特异性单克隆抗体.随后采用间接ELISA法测定抗血清效价,用protein G亲和纯化法纯化抗体,抗原竞争ELISA法鉴定抗体亲和力,SDS-PAGE法鉴定纯度,Western blotting鉴定抗cTnI单克隆抗体的特异性,竞争ELISA法分析抗原结合位点.结果 筛选出9株稳定分泌抗cTnI的单抗杂交瘤细胞株,其中A3、A9两株免疫球蛋白亚类均为IgG2a,分泌的抗体纯度高,与CK-MB、cTnT无交叉反应,效价均为：1：1024000,亲和力分别为4.21×10^8mol/L、1.07×10^8mol/L,抗原结合位点不同.结论 成功制备出了一对高亲和力、高特异性抗人cTnI单克隆抗体.
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| 关 键 词： | 人肌钙蛋白Ⅰ 单克隆抗体 亲和力 特异性 |
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