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| 人卵泡抑素基因短发夹RNA表达质粒的构建及其干扰效果的初步鉴定 | |
| 引用本文： | 莫毅,梁方方,陈月凤,江如兰,叶健,谢丹尼. 人卵泡抑素基因短发夹RNA表达质粒的构建及其干扰效果的初步鉴定[J]. 中国计划生育学杂志, 2013, 21(4): 231-233 |
| 作者姓名： | 莫毅 梁方方 陈月凤 江如兰 叶健 谢丹尼 |
| 作者单位： | 1. 广西壮族自治区人口和计划生育研究中心,南宁,530021 2. 广西壮族自治区畜牧研究所 3. 广西壮族自治区医科大学研究生院 |
| 摘 要： | 目的:构建人卵泡抑素(FS)基因短发夹RNA(shRNA)真核表达质粒,并瞬时转染方式初步鉴定其干扰效果。方法:依据GenBank数据库提供的人FS基因mRNA核苷酸序列,利用Ambion网站上siRNA软件设计shRNA干扰靶序列,将该序列克隆到线性化的pLKO.1质粒载体上,构建pLKO.1-FS-shRNA重组质粒,并进行酶切和测序鉴定。确认质粒构建成功后,用脂质体(Lipofectamine TM 2000)将重组质粒瞬时转染3AO人卵巢癌细胞系,并用实时定量反转录PCR法检测重组质粒对FS基因的表达抑制效果。结果:构建的shRNA序列经DNA测序证实与设计序列完全一致;实时定量反转录PCR结果显示pLKO.1-FS-shRNA重组质粒瞬时转染的3AO人卵巢癌细胞后,细胞中的FS基因转录受到抑制,抑制率达59%。结论:成功构建了靶向人FS基因的shRNA干扰靶序列重组质粒(PLKO.1-FS-shRNA),转染后对人卵巢癌细胞系FS基因的表达具抑制效果,该实验为进一步研究FS基因的生物学功能奠定基础。 |
| 关 键 词： | 卵泡抑素基因 RNA干扰 小发夹RNA |
Construction and preliminary identification of interference efficiency of FS gene shRNA expression plasmid |
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| Mo Yi , Liang Fangfang , Chen Yuefeng , Jiang Rulan , Ye Jian , Xie Danni. Construction and preliminary identification of interference efficiency of FS gene shRNA expression plasmid[J]. Chinese Journal of Family Planning, 2013, 21(4): 231-233 | |
| Authors: | Mo Yi Liang Fangfang Chen Yuefeng Jiang Rulan Ye Jian Xie Danni |
| Abstract: | |
| Keywords: | Follsitatin gene RNA interference Small hairpin RNA (shRNA) |
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