| 人分泌型白细胞介素-16基因的克隆及其原核表达 |
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| 引用本文： | 司传平,李淑玲,付嘉,李春霞,李志华,宋志刚.人分泌型白细胞介素-16基因的克隆及其原核表达[J].细胞与分子免疫学杂志,2012,28(12):1237-1241. |
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| 作者姓名： | 司传平 李淑玲 付嘉 李春霞 李志华 宋志刚 |
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| 作者单位： | 济宁医学院免疫学教研室,山东省“十二五”医学免疫学重点学科,山东济宁272067 |
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| 基金项目： | 山东省教育厅科技计划项目(J06L07) |
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| 摘 要： | 目的:克隆人分泌型IL-6 cDNA,构建IL-16的原核表达质粒,并观察其在大肠杆菌中的表达.方法:采用PCR技术从健康成人外周血单个核细胞(PBMC)总cDNA文库中扩增人分泌型IL-16 DNA片段;PCR产物分离纯化后,将其克隆至pUC18-T载体中,经PCR、酶切鉴定及DNA测序确证后,将该基因定向插入原核表达载体pMAL-C2,获得重组质粒pMAL-IL-16,然后将其转化至E.coli DH5α,经IPTG诱导表达,采用SDS-PAGE及Western blot法鉴定表达产物.结果:获得了编码人分泌型IL-16的cDNA,经测序证明其长度为393 bp,编码130个氨基酸;构建了IL-16原核表达载体,并应用E.coli DH5α表达,得到1个相对分子质量(Mr)约56000的IL-16重组融合蛋白,与理论大小相符,且经SDS-PAGE及Western blot法验证.表明人分泌型IL-16原核表达载体构建并表达成功.结论:本实验成功克隆了人分泌型IL-16 cDNA,构建了IL-16原核表达载体,并在大肠杆菌中获得表达,为IL-16的纯化奠定了基础.
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| 关 键 词： | 人分泌型白细胞介素-16 基因克隆 原核表达 |
Cloning and prokaryotic expression of human secreted IL-16 gene |
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| SI Chuan-ping,LI Shu-ling,FU Jia,LI Chun-xia,LI Zhi-hua,SONG Zhi-gang.Cloning and prokaryotic expression of human secreted IL-16 gene[J].Journal of Cellular and Molecular Immunology,2012,28(12):1237-1241. |
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| Authors: | SI Chuan-ping LI Shu-ling FU Jia LI Chun-xia LI Zhi-hua SONG Zhi-gang |
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| Institution: | Department of Immunology,Jining Medical College,Jining 272067,China |
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| Abstract: | |
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