| 靶向人STAT3基因的shRNA慢病毒载体的构建 |
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| 引用本文： | 党微旗,唐浩,曹红,王林,陈婷梅. 靶向人STAT3基因的shRNA慢病毒载体的构建[J]. 细胞与分子免疫学杂志, 2012, 28(11): 1204-1207 |
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| 作者姓名： | 党微旗 唐浩 曹红 王林 陈婷梅 |
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| 作者单位： | 重庆医科大学教育部临床检验诊断学重点实验室,重庆,400016 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(30971131) |
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| 摘 要： | 目的:构建并鉴定靶向人转录因子STAT3基因的shRNA慢病毒载体.方法:设计合成针对人STAT3基因的shRNA序列,运用基因重组技术将其插入到含U6启动子及绿色荧光蛋白基因的慢病毒表达载体pSicoR中,构建shRNA重组质粒pSicoR-STAT3-shRNA.经双酶切及DNA测序鉴定后,利用转染试剂X-tremeGENE HP将第3代慢病毒载体共转染至HEK293细胞进行病毒包装.以阴性载体为对照,用RT-PCR和Western blot分别检测STAT3基因和蛋白表达水平.结果:双酶切及测序证实载体构建正确,在HEK293中成功包装出高滴度慢病毒颗粒,感染HEK293后STAT3基因表达和蛋白质表达水平均较对照组明显降低(P＜0.05).结论:成功构建了靶向人STAT3基因的shRNA慢病毒载体.
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| 关 键 词： | STAT3 RNA干扰 慢病毒 乳腺癌 |
Construction of lentivirus-mediated short hairpin RNA targeting human STAT3 gene |
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| DANG Wei-qi,TANG Hao,CAO Hong,WANG Lin,CHEN Ting-mei. Construction of lentivirus-mediated short hairpin RNA targeting human STAT3 gene[J]. Chinese journal of cellular and molecular immunology, 2012, 28(11): 1204-1207 |
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| Authors: | DANG Wei-qi TANG Hao CAO Hong WANG Lin CHEN Ting-mei |
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| Affiliation: | Ministry of Education Key Laboratory of Laboratory Medical Diagnostics,Chongqing Medical University,Chongqing 400016,China |
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