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| 抗基质金属蛋白酶-2单克隆抗体的制备、鉴定及其应用 | |
| 引用本文： | 游牧,刘文,徐振山,宋礼华. 抗基质金属蛋白酶-2单克隆抗体的制备、鉴定及其应用[J]. 细胞与分子免疫学杂志, 2012, 28(11): 1177-1181 |
| 作者姓名： | 游牧 刘文 徐振山 宋礼华 |
| 作者单位： | 1. 淮南联合大学医学系,安徽淮南232038;安徽医科大学生物化学与分子生物学教研室,安徽合肥230032 2. 安徽医科大学生物化学与分子生物学教研室,安徽合肥,230032 3. 安徽安科工程(集团)股份有限公司,安徽合肥,230088 4. 安徽医科大学生物化学与分子生物学教研室,安徽合肥230032;安徽安科工程(集团)股份有限公司,安徽合肥230088 |
| 基金项目： | 国家“重大新药创制”科技重大专项(2008ZX09203-003);安徽省教育厅自然科学基金(KJ2011B155);淮南联合大学校级科研项目(CYB1002) |
| 摘 要： | 目的:制备和鉴定基质金属蛋白酶-2(MMP-2)单克隆抗体(mAb),检测其在人卵巢癌组织和裸鼠移植瘤中的表达.方法:利用戊二醛法制备人工抗原MMP-2-BSA和MMP-2-KLH,并免疫小鼠,采用标准杂交瘤技术,亚克隆筛选出单克隆细胞株,制备腹水,采用辛酸-硫酸铵法纯化mAb.以ELISA、Western blot法对抗体进行鉴定.通过免疫组织化学法与商品化多抗进行对比,并联合CA125将自制抗体应用于临床人卵巢癌组织和裸鼠移植瘤的检测.结果:人工抗原MMP-2-BSA和MMP-2-KLH合成成功.获取3株稳定分泌抗MMP-2的杂交瘤细胞株(3G10、4D12、1E8),抗体亚型均为IgG1.其中3G10反应性最强.经间接ELISA法检测纯化后抗体的效价达1∶1×106.自制mAb应用于人卵巢癌组织切片和裸鼠模型检测,卵巢癌组织与正常组织之间表达差异有统计学意义(P＜0.01).卵巢癌患者CA125和MMP-2联合检测阳性率较单一检测高(P＜0.01).自制mAb的染色特性与商品化抗体相似,且检出率较商品化多抗高(P＜0.01).结论:采用人工合成多肽作为免疫原成功制备了与卵巢癌相关的特异性抗MMP-2 mAb. |
| 关 键 词： | 基质金属蛋白酶-2 单克隆抗体 卵巢癌 裸鼠 联合检测 |
Preparation,identification and application of monoclonal antibody against matrix metalloproteinases-2 |
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| YOU Mu,LIU Wen,XU Zhen-shan,SONG Li-hua. Preparation,identification and application of monoclonal antibody against matrix metalloproteinases-2[J]. Chinese journal of cellular and molecular immunology, 2012, 28(11): 1177-1181 | |
| Authors: | YOU Mu LIU Wen XU Zhen-shan SONG Li-hua |
| Affiliation: | 2,3 1Department of Medicine,Huainan Union University,Huainan 232038;2Department of Biochemistry and Molecular Biology,Anhui Medical University,Hefei 230032;3Anhui Anke Biotechnology(group) Co,Ltd,Hefei 230088,China |
| Abstract: | |
| Keywords: | |
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