99Tcm标记MDM2反义寡核苷酸的实验研究

目的研究^99Tc^m标记小鼠双微体扩增基因（MDM2）mRNA的反义寡核苷酸（ASON）显像诊断乳腺癌的价值。方法以联肼尼克酰胺（HYNIC）为螯合物对ASON、错义寡核苷酸（ASONM）进行^99Tc^m标记，检测标记率、放化纯及其与互补正义链（SON）的结合能力。阳离子脂质体（1ipofectamine 2000）包裹反义探针及错义探针转染人乳腺癌细胞（MCF-7），通过RT-PCR和West-em．blotting法观察乳腺癌细胞MDM2mRNA和蛋白表达。建立荷人乳腺癌MCF-7裸鼠肿瘤模型，分别进行体内分布和肿瘤显像研究。结果ASON的标记率为（57．24-2．98）％（n=5），ASONM的标记率为（56．3±3．01）％（n=5），经纯化后放化纯可达95％以上，且仍保持与互补链的结合能力。不同浓度反义探针作用于乳腺癌细胞24h后，各浓度组MDM2mRNA和蛋白的表达量差异均有统计学意义（P〈0．01），而错义探针对MDM2mRNA和蛋白的表达没有明显影响。体内分布显示，反义及错义探针主要经肝、肾排泄，注射反义探针后，肿瘤／血液和肿瘤／骨骼肌放射性比值随时间的推移而增加。注射反义探针后1h肿瘤显影，肿瘤／对侧肢体放射性比值随时间推移而增加，各时间点错义探针在肿瘤内的聚集量均明显少于反义探针，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论^99Tc^m标记的MDM2ASON可在荷人乳腺癌MCF-7裸鼠肿瘤模型的肿瘤组织中特异性聚集，为乳腺癌的特异性诊断提供了一种可能的新方法。

Experiment of study on 99Tcm labeling MDM2 antisense oligonucleotide