建立99Tcm标记联肼尼克酰胺多肽"显像剂"纤维膜组合文库

目的证明^99 Tc^m标记联肼尼克酰胺（HYNIC）多肽“显像剂”文库是^99 Tc^m显像剂研制中的有效方法。方法八肽组合文库采用人工点阵方式合成。HYNIC多肽通过C末端以及双B丙氨酸（连接体）共价连接在纤维膜上。用阻断剂阻断非特异结合位点后，将膜文库和人重组热休克蛋白70（HSP70）温育，冲洗。用生物素-亲和素法和抗体法筛选文库。对筛选阳性多肽化合物进行再合成、^99 Tc^m标记（以三羟甲基甘氨酸为辅助配体）以及体内分析。将人肺癌细胞株A549和H460接种于雌性裸鼠胸壁皮下，用于体内研究。结果^99 Tc^m标记文库显示，“显像剂”文库的质量较好。由于天冬酰胺-亮氨酸-亮氨酸-精-氨酸-亮氨酸-苏氨酸-甘氨酸多肽（NLLRLTG）对HSP70家族蛋白具有高度特异性，因此，采用^99 Tc^m-HYNIC—NLLRLTG为对照组。经筛选获得的15种阳性多肽化合物中，有8种^99 Tc^m化合物在体内肿瘤中的分布优于对照组，其中^99 Tc^m HYNIC-谷氨酰胺-甘氨酸-缬氨酸-亮氨酸-苏氨酸．甘氨酸-苏氨酸-精氨酸多肽（QGVLTGTR）在体内肿瘤中的分布最佳。活性肽NLLRLTG替代实验和肿瘤热疗研究表明，^99 Tc^m HYNIC—QGVLTGTR具有HSP70结合肽活性。结论^99 Tc^m标记HYNIC八肽化合物“显像剂”文库的设计可能为多肽显像剂的研制提供一种模式。

A 99Tcm labeled HYNIC peptide "tracer" libraries on continuous cellulose membrane supports