TLR4-TRPC6在LPS致16HBE细胞内NF-κB P65表达和核转位的作用 |
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作者姓名: | 李业盛 凌振威 陈庆梓 吴佑森 叶绮婷 温启锐 戴永亮 李建华 周丽芬 |
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作者单位: | 广州医科大学基础学院基础医学研究中心;广州医科大学附属第三医院第三临床学院 |
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基金项目: | 国家自然科学基金资助项目(No.81470205);2017年度广东省省级大学生创新创业训练计划项目(No.201710570069);2017年度广州市高校创新创业教育项目(No.2017224103);广州医科大学2016年国家级大学生创新创业训练计划项目(No.201610570018);2018年度广州医科大学大学生实验室开放项目(广医大发[2018]27号) |
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摘 要: | 目的:探讨Toll样受体4(TLR4)和瞬时受体电位通道蛋白6(TRPC6)信号通路在细菌脂多糖(LPS)诱导气道上皮细胞16HBE内NF-κB P65表达和核转位的作用,为气道炎症的发生机制提供实验依据。方法:用LPS(1 mg/L)作用16HBE细胞0、0.5、2、6、12和24 h后,分别使用RT-PCR和Western blot法检测核因子κB (nuclear factor-κB,NF-κB) P65的mRNA和蛋白表达情况,并用免疫细胞化学染色法检测NF-κB P65的核转位。用RT-PCR、Western blot和免疫细胞化学染色法检测TLR4抑制剂CLI-095(5 μmol/L)对LPS(1 mg/L)诱导16HBE细胞NF-κB P65表达以及核转位的影响。用RT-PCR、Western blot和免疫细胞化学染色法检测TRPC6激动剂Hyp9(10 μmol/L)对LPS(1 mg/L)诱导16HBE细胞内NF-κB P65表达以及核转位的影响。结果: LPS上调16HBE细胞NF-κB P65的mRNA和蛋白表达及核转位。TLR4抑制剂CLI-095抑制LPS诱导的16HBE细胞内NF-κB P65的mRNA和蛋白表达及核转位。TRPC6激动剂Hyp9加重LPS诱导的16HBE细胞内NF-κB P65 的mRNA和蛋白表达及核转位。结论: LPS通过TLR4-TRPC6信号通路诱导16HBE细胞内NF-κB P65表达和核转位。
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关 键 词: | TLR4-TRPC6信号通路 气道上皮细胞 核因子-ΚB 核转位 脂多糖 |
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