解毒清肺合剂对肺炎支原体感染大鼠肺组织NF-κB和p38 MAPK通路的影响

目的:观察解毒清肺合剂对肺炎支原体(MP)感染大鼠肺组织的治疗作用并探讨其作用机制。方法:SD大鼠40只,随机分为对照组、模型组、解毒清肺组和阳性对照组4组,每组10只。实验组大鼠鼻孔内缓慢滴入1×10~9CFU/L MP菌液连续4 d,各组在接种完成后第2天处死1只大鼠进行MP核酸检测,同时其余大鼠开始灌胃治疗,空白对照组和模型组给予等量生理盐水灌胃,解毒清肺组每天给予8 mL/kg的解毒清肺合剂,阳性对照组给予地塞米松磷酸钠(0.5 mg·kg·d^-1),连续治疗4周。实验结束后处死大鼠,收集血清和支气管肺泡灌洗液(BALF),ELISA法检测血清和BALF中白细胞介素12(IL-12)、IL-13和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;取右肺组织用于观察病理形态和HE染色,左肺组织用于NF-κB p50、I-κBα和p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)的mRNA及蛋白水平的检测。结果:MP核酸检测结果显示,除空白对照组外其余大鼠均感染了MP,表明MP感染大鼠造模成功。治疗第1天模型组和解毒清肺组肺组织病理评分显著高于空白对照组(P<0.05),治疗结束后模型组的肺组织病理评分显著高于空白对照组、解毒清肺组和阳性对照组(P<0.01)。MP感染后模型组血清和BALF中IL-12水平显著低于空白对照组(P<0.05),解毒清肺组和阳性对照组血清和BALF中IL-12水平显著高于模型组(P<0.05);模型组大鼠血清和BALF中IL-13和TNF-α水平显著升高,解毒清肺组和阳性对照组IL-13和TNF-α水平显著低于模型组(P<0.05),解毒清肺组与阳性对照组无显著差异。RT-qPCR检测结果显示,模型组NF-κB p50和p38 MAPK的mRNA表达水平显著升高(P<0.01),解毒清肺组和阳性对照组NF-κB p50和p38 MAPK的mRNA表达水平与模型组比较显著降低(P<0.01);模型组I-κBα的mRNA表达水平较对照组显著降低,解毒清肺组和阳性对照组I-κBα的mRNA表达水平较模型组显著升高(P<0.05),解毒清肺组NF-κB p50、p38、MAPK和I-κBα与阳性对照组比较差异无统计学显著性。Western blot检测结果显示肺组织中模型组的NF-κB p50和p38 MAPK蛋白表达水平显著高于空白对照组,治疗后表达水平显著降低;模型组I-κBα蛋白表达水平显著低于空白对照组,解毒清肺组其蛋白表达水平显著升高,解毒清肺组与阳性对照组无显著差异。结论:解毒清肺合剂可能通过NF-κB和p38 MAPK通路减轻肺炎支原体引起的肺组织炎症。