鞘内注射γ-氨基丁酸转运体抑制剂NO-711在骨癌痛大鼠脊髓水平抑制磷酸化细胞外信号调节激酶1／2的上调

目的探讨脊髓水平脊髓细胞外信号调节激酶1／2（extracellular regulated kinase1／2，ERK1／2）活化在大鼠骨癌痛发生中的作用。方法实验1：雌性SD大鼠48只，体重160g-200g，按随机数字表法分成2组（每组24只），A组（对照组）、B组（模型组）。采用胫骨上段骨髓腔接种Walker-256乳腺癌细胞方法制备大鼠骨癌痛模型。于术前1d、术后1、3、5、7、10、14、21d测定大鼠机械刺激缩足反射阈值（mechanical withdrawal threshold，MWT）和自由行走痛行为学评分（arabulatory-evoked painscores，APS），术后第7、14、21天取大鼠腰段脊髓，采用Western blot方法检测ERK1／2的表达。实验2：60只大鼠按随机数字表法分为5组（每组12只）：S组、N1组、N2组、N3组和N4组。假手术组＋生理盐水（S组）、骨癌痛＋生理盐水（N1组）、骨癌痛＋NO-71110ug（N2组）、骨癌痛＋NO-71120ug（N3组）、骨癌痛＋NO-71140ug（N4组）。于术后第14天鞘内分别给予生理盐水（S组、N1组）、γ-氨基丁酸转运体（γ-aminobutyric acid transporter-1，GAT-1）抑制剂NO-711 10 ug（N2组）、NO-711 20ug（N3组）、NO．711 40ug（N4组）。最后一次给药后0．5、1、2、4、8、12、24h观察大鼠MWT和APS，于给药后4h取腰段脊髓，采用Western blot方法检测脊髓磷酸化细胞外信号调节激酶（phopho-extracellular regulated kinasel／2，p-ERK1／2）的表达。结果实验1：与A组和手术前比，从术后第7天开始，B组MWT（8．02±0．30）显著降低（P〈0．01），APS（0．88±0．22）和p-ERK1／2表达显著升高（P〈0．01）。实验2：与给药前相比，N1组大鼠MWT和APS在鞘内给予生理盐水（NS）后无明显改变。与给药前和N1组相比，NO-711可显著提高骨癌痛大鼠MWT（P〈0．05），其作用时间可分别达8h（N2组，6．49±0．64）和12h（N3组12．40±1．37、N4组11．48±0．69），但不能改善骨癌痛大鼠APS。免疫蛋白印迹法（Western blot）：与s组相比，M组p-ERK1／2表达明显上调（P〈0．01）；与N1组相比，N2、N3、N4组p-ERK1／2表达含量降低（P〈0．01）。结论脊髓背角p-ERK表达上调参与了骨癌痛的产生，NO-711通过抑制p-ERK表达上调缓解骨癌痛大鼠机械痛觉过敏。