| 重症肌无力单链抗体融合蛋白的酵母菌表达及特异性鉴定 |
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| 作者姓名： | 李芳芳 孟繁平 孙昌元 温爱萍 魏晶 李红花 李英信 |
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| 作者单位： | 延边大学基础医学院免疫学与病原生物学教研部,吉林,延吉,133000 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 |
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| 摘 要： | 目的: 真核表达抗人乙酰胆碱受体单链抗体637(scFv637)与人血清白蛋白(HSA)的融合蛋白,以提高融合蛋白的产量和增强其生物学活性.方法: 将携带有重组质粒的毕赤酵母菌GS115用G-418筛选高拷贝重组转化子克隆,诱导表达目的蛋白,表达产物用斑点杂交试验检测,并以SDS-PAGE鉴定融合蛋白的相对分子质量(Mr),应用间接免疫荧光技术确定融合蛋白与人肋间肌乙酰胆碱受体(AChR)的亲和性.结果: 斑点杂交试验显示成功表达出目的蛋白,其Mr约为97 400,在人肋间肌细胞膜之间有荧光出现.结论: 在毕赤酵母菌GS115中成功表达出scFv637-HSA融合蛋白,并且融合蛋白可以与人肋间肌AChR结合,这为进一步研究融合蛋白的功能和应用奠定了基础.
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| 关 键 词： | 重症肌无力 乙酰胆碱受体 单链抗体 融合蛋白 真核表达 |
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