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亚砷酸诱导人食管癌细胞株EC109细胞p15INK4B基因的表达
引用本文:张学彦,刘铁夫,刘伟,崔希威.亚砷酸诱导人食管癌细胞株EC109细胞p15INK4B基因的表达[J].世界华人消化杂志,2006,14(19):1859-1863.
作者姓名:张学彦  刘铁夫  刘伟  崔希威
作者单位:1. 哈尔滨医科大学附属二院消化科,黑龙江省,哈尔滨市,150086
2. 哈尔滨医科大学附属四院消化科,黑龙江省,哈尔滨市,150000
3. 哈尔滨医科大学附属二院分子实验中心,黑龙江省,哈尔滨市,150086
4. 哈尔滨医科大学附属二院计算机中心,黑龙江省,哈尔滨市,150086
基金项目:黑龙江省科技攻关计划;黑龙江省卫生厅科研项目
摘    要:目的:研究亚砷酸(As_2O_3)对人食管癌EC109细胞株细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子p15~(INK4B)(p15)基因表达的影响.方法:终浓度2μmol/L的As_2O_3加入食管癌EC109细胞系,采用甲基化特异PCR(MSP)检测食管癌EC109细胞系中p15基因甲基化,采用RT-PCR和Western blot方法检测As_2O_3处理前后p15的mRNA和蛋白质水平的表达情况.用Scion Image软件测量条带灰度值,P15蛋白与ACTB条带的灰度比进行半定量分析.结果:EC109细胞p15基因发生高甲基化,p15基因不表达.As_2O_3作用后p15基因甲基化程度明显下降,As_2O_3作用72,48,24 h组和未加药组之间差异均有统计学意义(37.11±3.62,50.92±5.47,72.07±7.53 vs 97.23±9.80,P<0.05).As_2O_3作用24 h后出现p15 mRNA表达,随As_2O_3作用时间延p15 mRNA表达逐渐增强,各个时间组之间比较,除了未加药组和加药24 h组之间及加药24 h组和加药48 h组之间差异无统计学意义外,其余各个时间组之间差异有统计学意义(0.72±0.07 vs 0.58±0.06 vs 0.48±0.07 vs 0.41±0.08,P<0.05).As_2O_3作用24 h后P15蛋白出现表达,2μmol/L作用24-72 h中P15蛋白条带灰度逐渐增强,As_2O_3作用72,48,24 h组和未加药组之间差异均有统计学意义(0.51±0.02 vs 0.21±0.01 vs 0.16±0.02 vs 0.06±0.01,P<0.05),说明其表达随As_2O_3作用时间延长而逐渐增强.结论:As_2O_3可使食管癌EC109细胞p15基因去甲基化,使p15基因表达上调,从而抑制细胞周期进程.

关 键 词:亚砷酸  p15~(INK4B)  甲基化  食管癌
收稿时间:2006-04-13
修稿时间:2006年4月13日

Expression of p15INK4B gene induced by arsenic trioxide in esophageal cancer cell line EC109
Xue-Yan Zhang,Tie-Fu Liu,Wei Liu,Xi-Wei Cui.Expression of p15INK4B gene induced by arsenic trioxide in esophageal cancer cell line EC109[J].World Chinese Journal of Digestology,2006,14(19):1859-1863.
Authors:Xue-Yan Zhang  Tie-Fu Liu  Wei Liu  Xi-Wei Cui
Abstract:
Keywords:Arsenic trioxide  p15~(INK4B) gene  Methylation  Esophageal cancer
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