添加细胞因子优化人外周血γδ T细胞的体外扩增培养体系 |
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引用本文: | 王淑莉,陈慧,陆必超,张建民,何维.添加细胞因子优化人外周血γδ T细胞的体外扩增培养体系[J].基础医学与临床,2017,37(6). |
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作者姓名: | 王淑莉 陈慧 陆必超 张建民 何维 |
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作者单位: | 中国医学科学院 北京协和医学院 基础医学研究所 医学分子生物学国家重点实验室,北京,100005 |
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基金项目: | 国家自然科学基金,国家自然科学基金青年项目,中国医学科学院基本科研业务项目 |
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摘 要: | 目的从添加细胞因子角度,优化用于肿瘤过继免疫治疗的γδ T细胞体外扩增培养方案。方法在固相化抗TCRγδ抗体加IL-2扩增人外周血γδ T细胞的体系基础上,添加其他的γ链受体家族细胞因子,包括IL-7、IL-15或IL-21,单独或联合使用、长期使用或短时添加,通过流式细胞术检测γδ T细胞纯度、细胞增殖及细胞毒活性相关分子的表达,计算γδ T细胞扩增效率;乳酸脱氢酶法检测γδ T细胞对人Burkitt's淋巴瘤细胞系Daudi的细胞毒活性。结果单独使用IL-7或IL-21不能有效扩增γδ T细胞,但单独使用IL-15可以使γδ T细胞纯度、扩增效率及细胞毒活性均达到与单独使用IL-2相当的水平;IL-2与IL-15联合使用,可促进γδ T细胞表达CD69,从而显著提高其扩增效率(P0.05);而IL-2与IL-21联合使用,可通过促进γδ T细胞颗粒酶A的表达,增强其对Daudi细胞的细胞毒活性(P0.001);IL-2、IL-15和IL-21联合使用可以显著提高γδ T细胞的细胞毒活性,但是会影响其扩增效率;而仅在效应前短时间添加IL-21,同样可以有效增强γδ T细胞对肿瘤细胞的细胞毒活性(P0.05)。结论在用固相化TCRγδ抗体加IL-2体外扩增培养γδ T细胞体系中,使用IL-15,而在回输效应前短时间添加IL-21,显著提高γδ T细胞扩增效率及对肿瘤细胞的细胞毒活性,此为目前最优化的γδ T细胞体外扩增培养方案。
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关 键 词: | γδT细胞 体外扩增 白细胞介素-15 白细胞介素-21 |
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