TGF-β1诱导大鼠肝星状细胞系HSC-T6活化及上皮间质转换 |
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引用本文: | 王丽惠,程变巧,朱琪,林伟国.TGF-β1诱导大鼠肝星状细胞系HSC-T6活化及上皮间质转换[J].基础医学与临床,2017,37(9). |
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作者姓名: | 王丽惠 程变巧 朱琪 林伟国 |
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作者单位: | 1. 厦门大学 医学院,福建 厦门,361100;2. 厦门大学附属福州第二医院 肝胆内科,福建 福州,350007 |
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基金项目: | 福建省科技计划,福州市科技计划 |
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摘 要: | 目的探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)在大鼠肝星状细胞系(HSC-T6)活化及上皮间质转换(EMT)中的作用。方法体外培养HSC-T6,用MTT法筛选TGF-β1对HSC-T6作用的最佳浓度;用10μg/L TGF-β1处理HSC-T6 24 h,相差倒置显微镜下观察细胞形态改变,免疫荧光染色法检测细胞骨架结构F-actin蛋白的表达,RT-q PCR法检测肌动蛋白α-SMA及代表上皮间质转换的神经黏附素(N-cadherin)、波形蛋白(vimentin)和上皮黏附素(E-cadherin)基因表达;用不同浓度(0、5和10μg/L)的TGF-β1处理HSC-T6 24 h,Western blot检测α-SMA、N-cadherin、vimentin和E-cadherin蛋白表达。结果 10μg/L TGF-β1干预HSC-T6 24 h有最好的细胞存活率;TGF-β1刺激HSC-T6后,细胞拉伸,伪足增多呈星形,细胞间连接疏松,呈显著活化状态;F-actin聚集形成应力纤维丝,沿细胞长轴分布;实验组α-SMA mRNA及vimentin mRNA的表达量明显高于对照组(P0.05),而E-cadherin mRNA的表达量明显降低(P0.05);在不同浓度的TGF-β1呈剂量依赖性致α-SMA及N-cadherin和vimentin的蛋白表达量增多,而E-cadherin的蛋白表达量减少。结论 TGF-β1可诱导HSC-T6活化及上皮间质转换。
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关 键 词: | TGF-β1 肝星状细胞 活化 上皮间质转换 |
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