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人大细胞肺癌高低转移株差异表达基因消减cDNA文库的构建和初步筛选
引用本文:李娟,周清华,陈军,朱大兴,马力,闫惠琴,朱文,刘红雨. 人大细胞肺癌高低转移株差异表达基因消减cDNA文库的构建和初步筛选[J]. 中国肺癌杂志, 2007, 10(3): 163-167
作者姓名:李娟  周清华  陈军  朱大兴  马力  闫惠琴  朱文  刘红雨
作者单位:1. 610041,成都,四川大学华西医院四川省肺癌分子实验室
2. 610041,成都,四川大学华西医院四川省肺癌分子实验室;300052,天津医科大学总医院天津市肺癌研究所
3. 300052,天津医科大学总医院天津市肺癌研究所
基金项目:国家自然科学基金;天津市科技支撑计划重点项目
摘    要:背景与目的 筛选肺癌转移相关基因有助于阐明肺癌侵袭转移的分子机理.为了筛选不同转移潜能肺癌的转移相关差异表达基因,本研究构建不同转移潜能的人大细胞肺癌细胞株NL9980和L9981间差异表达基因的消减cDNA文库,并对消减文库进行初步筛选.方法 应用抑制消减杂交技术构建人大细胞肺癌高低转移株NL9980与L9981间差异表达基因的正向消减cDNA文库和反向消减cDNA文库,利用α互补原理,经蓝白菌落初步筛选获得阳性克隆,应用斑点杂交的方法对正向和反向消减cDNA文库进行杂交筛选.结果 成功构建了人大细胞肺癌高低转移株差异表达基因的正向消减cDNA文库和反向消减cDNA文库.经蓝白菌落筛选和斑点杂交,正向消减文库获得了307个阳性克隆,反向消减文库获得了78个阳性克隆.结论 抑制消减杂交是克隆差异表达基因的有效方法,利用此方法可以成功构建人大细胞肺癌高低转移株差异表达基因消减cDNA文库.不同转移潜能人大细胞肺癌细胞株中存在可能与转移相关的差异表达基因.

关 键 词:肺肿瘤  转移相关基因  抑制消减杂交  斑点杂交
修稿时间:2007-04-10

Construction and screening of the subtracted cDNA library of human large cell lung cancer lines with different metastatic potentials
LI Juan,ZHOU Qinghua,CHEN Jun,ZHU Daxing,MA Li,YAN Huiqin,ZHU Wen,LIU Hongyu. Construction and screening of the subtracted cDNA library of human large cell lung cancer lines with different metastatic potentials[J]. Chinese journal of lung cancer, 2007, 10(3): 163-167
Authors:LI Juan  ZHOU Qinghua  CHEN Jun  ZHU Daxing  MA Li  YAN Huiqin  ZHU Wen  LIU Hongyu
Abstract:
Keywords:Lung neoplasms Metastatic-related genes Suppression subtractive hybridization Dot blot
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