基于胚胎干细胞实验模型评价辛弗林的胚胎毒性

摘要：目的:应用胚胎干细胞实验模型评价辛弗林的胚胎毒性。方法:分别将小鼠成纤维细胞NHI/3T3和小鼠胚胎干细胞ES-D3用含不同浓度辛弗林的培养基进行培养,CCK-8法检测辛弗林对3T3细胞和D3细胞的半数生长抑制浓度IC503T3和IC50D3。悬滴-悬浮-贴壁法培养D3细胞向心肌细胞分化,并通过实时定量PCR法检测不同辛弗林浓度培养条件下心肌分化特异基因肌球蛋白重链（β-MHC）的表达,计算D3细胞半数分化抑制浓度ID50D3。再将IC503T3、IC50D3和ID50D3代入胚胎毒性评价公式计算,根据计算结果评价辛弗林的胚胎毒性。结果:辛弗林对3T3细胞和D3细胞的半数生长抑制浓度IC503T3和IC50D3分别为（1 393.70±12.68） mg·L-1和（1 127.01±22.18）mg·L-1,对D3细胞半数分化抑制浓度ID50D3为（822.60±9.59） mg·L-1。计算结果显示Ⅰ值>Ⅱ值,且Ⅰ值>Ⅲ值。结论:根据胚胎干细胞实验判定标准,预测辛弗林无胚胎毒性。