全反式维甲酸抑制核因子 E2相关因子 2和血红素加氧酶 1加重大鼠肾脏缺血再灌注损伤表达

目的观察用全反式维甲酸( all-trans retinoic acid，ATRA)抑制核因子 E2相关因子 2(Nrf2)和血红素加氧酶 1(HO-1)是否会加重大鼠肾脏缺血再灌注损伤( IRI)表达。方法 2020年 10月至 2022年 2月选取 24只健康成年雄性 SD大鼠切除右肾，并按随机数字表法分为 3组( n=8)，即假手术组( Sham)、肾脏缺血再灌注( I/R)组、全反式维甲酸( I/R+ATRA)组。其中 Sham组和 I/R组给予腹腔注射玉米油( 1 mL·kg?1·d?1)1周， ATRA组则给予腹腔注射溶于玉米油的 ATRA(10 mg·kg?1·d?1)1周后， 3组大鼠用 10%的水合氯醛( 0.3 mL/100 g)进行麻醉后固定四肢，将其在 37 ℃条件下沿腹中线打开腹腔并分离出左肾动脉。其中 Sham组切除右肾，不予以夹闭左肾动脉； I/R组和 ATRA组采用右肾切除联合左肾动脉夹闭 45 min后再灌注 24 h的方法建立大鼠肾脏 I/R模型。实验结束后收集 3组大鼠血清及肾组织标本，用比色法检测血清肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)浓度； HE染色法观察肾组织病理改变； TUNEL法进行肾组织细胞凋亡的检测；二氢乙啶( DHE)荧光染色评估肾组织活性氧的表达情况；通过比色法检测肾组织丙二醛( MDA)浓度、超氧化物歧化酶( SOD)活性；用蛋白质印迹法分别对 Nrf2、HO-1的表达进行检测。结果与 Sham组相比， I/R组大鼠肾组织 Nrf2、HO-1蛋白表达量均增加( P<0.01)活性氧表达量增加， SOD活性下降， MDA含量、血清 Scr、BUN浓度升高( P<0.01)肾小管损伤评分及凋亡细胞表达较高(P<0.05)，其中 Nrf2蛋白和 HO-1蛋白分别为 0.52±0.09和 0.37±0.79，高于Sham组的0.06±，0.01和 0.02±0.01。与 I/R组相比， I/R+ATRA组大，鼠肾组织 Nrf2、HO-1蛋白显著减少( P<0.01)活性氧表达量明显增加， SOD活性严重下降， MDA含量、血清 Scr、BUN浓度明显升高( P<0.01)肾小管损伤评分显著增加，凋亡细胞表达亦增高( P<0.05)其中 I/R+ATRA组 Nrf2蛋白和 HO-1蛋白分别为 0.29±0.04.15±0.03，显著低于 I/R组。结论 Nrf2/HO-1通路参与肾脏缺灌注损伤过程， ATRA可能通过抑制 Nrf2/HO-1通路，加重氧化应激，进一步加重肾肾脏，和0，血再，

ATRA inhibits Nrf2 and HO-1 expression to aggravate the renal ischemia-reperfusion injury in rats