乌头汤通过下调HIF-1α/VEGFA/Ang信号通路抑制AIA风寒湿痹证大鼠血管翳形成

目的 探讨乌头汤对佐剂型关节炎（AIA）风寒湿痹证大鼠血管翳形成的抑制作用及其潜在作用机制。方法 将无特定病原体（SPF）雄性SD大鼠40只，按随机数字表法分为空白组、AIA风寒湿痹证组［完全弗氏佐剂（CFA），200 μg］、乌头汤组（15 g·kg^-1·d^-1）、吲哚美辛组（10 mg·kg^-1），除空白组外，其余各组注射CFA前给予风寒湿刺激。连续给药30 d，期间观察AIA风寒湿痹证大鼠的基本情况、发病时间、关节炎评分、足容积。最终取外周动脉血、踝关节和滑膜组织。酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）、血管内皮生长因子A（VEGFA）蛋白含量和风湿3项，包括抗O（ASO）、C反应蛋白（CRP）和类风湿因子（RF）；苏木素-伊红（HE）染色观察关节组织形态学改变；免疫组化检测踝关节通路关键蛋白HIF-1α和VEGFA；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测大鼠滑膜组织中HIF-1α、VEGFA、血管生成素-1（Ang-1）、血管生成素-2（Ang-2）mRNA表达。结果 与空白组比较，AIA风寒湿痹证大鼠足肿容积和关节炎评分显著升高（P<0.01）；血清CRP、RF、ASO阳性表达显著（P<0.01）；HE染色可见踝关节滑膜炎性增生，血管新生、血管翳形成，骨破坏程度加重，提示模型构建成功。乌头汤干预后，发病时间显著延迟（P<0.01）；足容积和关节炎评分显著降低（P<0.01）；血清CRP、RF、ASO含量显著下降（P<0.01）；滑膜组织炎性增生明显缓解，血管新生及血管翳减少，骨破坏减轻；滑膜HIF-1α、VEGFA、Ang-1、Ang-2 mRNA明显降低（P<0.05，P<0.01）；血清与踝关节HIF-1α和VEGFA蛋白表达显著下降（P<0.01）。在吲哚美辛组中，大鼠发病时间显著延迟（P<0.01）；足容积和关节炎评分显著降低（P<0.01）；血清CRP、RF、和ASO含量显著下降（P<0.01）；HIF-1α/VEGFA/Ang信号通路激活，病理组织损伤改善。结论 乌头汤可延缓AIA风寒湿痹证大鼠发病时间，降低足容积、关节炎评分、风湿活动度，改善关节组织病理情况，对血管翳形成具有抑制作用，其作用机制可能与下调HIF-1α/VEGFA/Ang通路表达有关。