荧光染色法对组织病理诊断棘阿米巴性角膜炎价值的研究

目的：将荧光染色技术应用于组织病理诊断棘阿米巴性角膜炎(AK)，并将阅片结果与HE染色和PAS染色的阅片结果进行比较，分析这3种染色方法的敏感性与特异性，探究荧光染色技术在角膜组织活检中检测阿米巴病原体的应用价值。

方法：回顾性研究。收集2015-05/2020-06于山东第一医科大学附属眼科医院就诊的感染性角膜炎患者的手术切除标本74例75眼。根据角膜刮片、培养和组织病理诊断结果，将感染性角膜标本分为AK组和非棘阿米巴性角膜炎(NAK)组。将连续切片的组织分别行HE染色、PAS染色和荧光染色，分析3种染色方法对AK诊断的敏感性与特异性，使用受试者工作特征(ROC)曲线计算曲线下面积(AUC)，并进一步分析在同一部位相同倍率视野下，计数三种染色方法找到棘阿米巴病原体的数量，明确荧光染色法对AK的诊断价值。

结果：HE染色的敏感性为69%(27/39)、特异性为92%，PAS染色的敏感性为62%(24/39)、特异性为97%，荧光染色的敏感性为95%(37/39)、特异性为97%，3种染色方法对AK诊断的敏感性存在差异(χ²=19.857，P<0.001)； 进行两两比较发现，HE染色、PAS染色与荧光染色诊断AK的敏感性有差异(P=0.003、<0.001)，HE染色与PAS染色诊断AK的敏感性没有差异(P=0.978)； AUC最大为荧光染色(0.960)，其次分别为HE染色(0.804)，PAS染色(0.794)。计数在同一部位相同倍率视野下，HE染色、PAS染色和荧光染色查见棘阿米巴包囊数量的中位数分别为4(0，11)、2(0，9)、12(3，33)个(χ²=56.561，P<0.001)； 进行两两比较发现，HE染色和荧光染色、PAS染色和荧光染色找到棘阿米巴包囊的数量有差异(P<0.001)，HE和PAS两种染色方法找到棘阿米巴包囊的数量没有差异(P=0.210)，荧光染色的组织病理切片更容易辨别阿米巴病原体。

结论：荧光染色技术应用于组织病理诊断AK的敏感性比HE染色和PAS染色高，可显著提高阿米巴病原体检测的阳性率。

Value of fluorescence staining in histopathological diagnosis of Acanthamoeba keratitis