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siRNA沉默EphB2表达对胰腺癌CFPAC-1细胞增殖和凋亡的影响
引用本文:欧阳华强,谢广茹,潘战宇,陈冲,李玲. siRNA沉默EphB2表达对胰腺癌CFPAC-1细胞增殖和凋亡的影响[J]. 中国肿瘤生物治疗杂志, 2011, 18(6)
作者姓名:欧阳华强  谢广茹  潘战宇  陈冲  李玲
作者单位:天津市肿瘤防治重点实验室,天津医科大学附属肿瘤医院中西医结合科,天津300060
基金项目:天津市自然科学基金项目
摘    要:目的:应用慢病毒介导的RNA干扰技术,靶向沉默人胰腺癌CFPAC-1细胞中的EphB2基因的表达,观察EphB2对CFPAC-1细胞增殖和凋亡的影响.方法:构建靶向EphB2基因的siRNA干扰质粒,通过LipofectamineTM2000将干扰质粒转染进293T细胞,筛选出能有效抑制EphB2蛋白表达的干扰序列.构建含有效序列的慢病毒载体pLentiGFP-EphB2,感染CFPAC-1细胞,筛选出稳定干扰EphB2蛋白表达的CFPAC-1细胞系.定量PCR、Western blotting检测CFPAC-1细胞中EphB2mRNA和蛋白的表达,CCK8法和流式细胞术检测EphB2下调对CFPAC-1细胞增殖和凋亡的影响.结果:成功构建了EphB2慢病毒干扰载体pLentiGFP-EphB2,获得稳定转染pLentiGFP-EphB2的CFPAC-1细胞(CFPAC-1 EphB2 RNAi).CFPAC-1EphB2 RNAi细胞中EphB2 mRNA和蛋白表达较空载体组显著降低,EphB2 mRNA的沉默效率为63%.与空载体组和未转染组相比,pLentiGFP-EphB2感染显著促进CFPAC-1细胞的增殖(1.89±0.17 vs l.63 ±0.13、1.71 ±0.22,P<0.05),抑制细胞的凋亡[(7.02±1.27)%vs(13.37±1.89)%、(15.71±2.35)%,P<0.05].结论:pLentiGFP-EphB2可有效下调胰腺癌CFPAC-1细胞中EphB2的表达,促进CFPAC-1细胞增殖和抑制其凋亡.

关 键 词:EphB2:RNA干扰  胰腺癌  CFPAC-1细胞  增殖  凋亡

Effect of siRNA silencing EphB2 expression on proliferation and apoptosis of pancreatic cancer CFPAC-1 cells
OUYANG Hua-qiang , XIE Guang-ru , PAN Zhan-yu , CHEN Chong , Li Ling. Effect of siRNA silencing EphB2 expression on proliferation and apoptosis of pancreatic cancer CFPAC-1 cells[J]. Chinses Journal of Cancer Biotherapy, 2011, 18(6)
Authors:OUYANG Hua-qiang    XIE Guang-ru    PAN Zhan-yu    CHEN Chong    Li Ling
Abstract:
Keywords:
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